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10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片

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更新時間:2017-07-17 13:47:32瀏覽次數:141次

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10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片詳細說明書:

10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
10nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
17-trans Prostaglandin E3 1 mg     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-prosta-5Z13E17E-trien-1-oic acid 17-trans PGE3 17-trans Prostaglandin E3

SMAD3 Inhibitor, SIS3 1 mg     1-3,4-dihydro-6,7-dimethoxy-21H-isoinoneolinyl-3-1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl-2-propen-1-one

*(1GM     Timentin 15:1 Ticarcillin Disodium Salt / potewwium Clavulanate Mixture

MIF Antagonist 5 mg     45-dihydro-3-4-hydroxyphenyl-5-isoxazoleacetic acid methyl ester Macrophage Migration Inhibitory Factor|ISO-1 MIF Antagonist

8-hydroxy Guanine hydrochloride 25 mg     2-amiH-purine-68-dione monohydrochloride 8-Oxoguanine|NSC 22728-hydroxy Guanine hydrochloride

MAP Kinase Signaling Inhibitor Panel PathwayReady     PathwayReady MAP Kinase Signaling Inhibitor Panel
Methyltransferase Enzyme Mixture 1 ea     MT Enzyme Mixture Methyltransferase Enzyme Mixture

*標記單甲基化組蛋白H3K9多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K9 Peptide 200 ul

Pimelic Diphenylamide 106 25 mg     N1-2-aminophenyl-N7-4-methylphenyl-heptanediamide TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII Pimelic Diphenylamide 106

Z-AEVD-FMK 500 ug     Z-Ala-Glu-Val-Asp-Fluoromethyl Ketone methyl-14S-2-fluoroacetyl-11S-isopropyl-8S-3-methoxy-3-oxopropyl-5S-methyl-3,6,9,12-tetraoxo-1-phenyl-2-oxa-4,7,10,13-tetraazahexadecan-16-oate

JWH 203 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5 500 ug     2-2-chlorophenyl-1-1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-ylethan-1-one-24567-d5 JWH 203 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5

17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide (1 mg)     .,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide 17-phenyl trinor PGF2α ethyl amide|15(S)-Bimatoprost|Bimatoprost 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amide
Goat Anti-Mouse IgG 500 dtn     Goat Anti-Mouse IgG

Azumolene wo7ium salt 5 mg     EU4093 1-[[[5-4-bromopxenyl-2-oxazolyl]metxylene]amino]-2,4-imidazolidinedione, monowo7ium salt

FITC-C6-LEHD-FMK     FITC-C6-LEHD-FMK

Rasagiline 25 mg     1R-23-dixy7no-N-2-propyn-1-yl-1H-inden-1-amine Azilect Rasagiline

11Z),14Z-Eicosadienoic Acid 500 mg     11Z14Z-eicosadienoic acid 11Z),14Z-Eicosadienoic Acid

5-     +-Abscisic acid
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