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雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸

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更新時間:2017-07-17 13:49:47瀏覽次數:82次

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雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸詳細說明書:

Prostaglandin F1α 50 mg     9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid PGF1α; Prostaglandin F1α

JNK Inhibitor VIII 5 mg     c-Jun N-terminal Kinase Inhibitor VIII N-4-amino-5-cyano-6-ethoxy-2-pyridinyl-2,5-dimethoxy-benzeneacetamide

Tris堿(500GM     TRIS Base 77-86-1 MW 121.13 Molecular Biology Grade

CUR 61414 10 mg     N-[3S5S-1-13-benzodioxol-5-ylmethyl-5-1-piperazinylcarbonyl-3-pyrrolidinyl]-N-[3-methoxyphenylmethyl]-33-dimethyl-but* G-856 CUR 61414

8-hydroxy Guanosine 5 mg     8-hydroxy-guanosine 8-hydroxy Guanosine

Stem Cell Fate Regulator Set VII     DiscoveryPak Stem Cell Fate Regulator Set VII
Methyltransferase Resorufin Standard 1 ea     MT Resorufin Standard Methyltransferase Resorufin Standard

組蛋白H3多肽(安基酸:15-39     Histone H3 Peptide residues 15-39 100 ul

N-3-oxo-tetradec-7Z-enoyl-L-Homoserine lactone 5 mg     3-oxo-N-[3S-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-7-tetradecenamide 3-oxo-C14:1-Δ7cis-L-HSL N-3-oxo-tetradec-7Z-enoyl-L-Homoserine lactone

Ac-VEID-AMC 10 mg     Caspase-6 Substrate Fluorogenic|N-Acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-7-amido-4-Methylcoumarin N-acetyl-L-valyl-L-α-glutamyl-L-isoleucyl-N-4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl-L-α-asparagine

JWH 203 N-pentanoic acid metabolite-d5 100 ug     5-3-2-2-chlorophenylacetyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid-24567-d5 JWH 203 N-pentanoic acid metabolite-d5

T4 DNA Ligase Buffer     T4 DNA Ligase Buffer
Precoated Mouse Anti-Rabbit IgG EIA 96-Well Strip Plate 1 ea     Precoated Mouse Anti-Rabbit IgG EIA 96-Well Strip Plate

Danazol 50 mg     Danocrine|Ladogal|NSC 270916|WIN 17,757 pregna-2,4-dien-20-yno[2,3-d]isoxazol-17α-ol

TF4-VAD-FMK     TF4-VAD-FMK

MitoXpress -Xtra 1 ea     MitoXpress -Xtra

Decanoyl m-nitnoaniline 10 mg     N-3-nitnopxenyl-dec* DemNA Decanoyl m-nitnoaniline

2-4-tert-Butylpxenyl-1H-benzimidazole 2-[4-11-Dimetxyletxylpxenyl]-1H-benzimidazole     ZLN005
鈉胰酪胨大豆肉湯250g用于*的MPN測定,增菌培養(GB標準)

酸化K氏培養基 250g 用于果汁和濃縮果汁中環脂芽孢桿菌和其它的耐熱耐酸菌的檢測的。

胰胨大豆胨固綠瓊脂 Tryptic Soy Fast Green Agar 250 用于濾膜細菌總數的測定和分離培養(NEOGEN方法)

MS培養基250g/瓶含瓊脂,廣泛用于植物的器官、花藥、細胞和原生質體的培養incubationmediaMS培養基250g/瓶含瓊脂,廣泛用于植物的器官、花藥、細胞和原生質體的培養

3%堿性蛋白胨水
麥康凱肌醇阿東醇羧卞*瓊脂(MZAC)250g用于食品中克雷伯氏菌分離培養

大腸桿菌顯色培養基 用于大腸桿菌鑒定和計數 1000ml incubation media 大腸桿菌顯色培養基 用于大腸桿菌鑒定和計數 1000ml

抗輻射鏈霉菌 分離源:金針菇培養料。 /

無菌病毒運輸液(VTM)3ml/*36用于甲流病毒標本運送

哥倫比亞瓊脂培養基(新藥典) 250g 用于梭菌的選擇性分離培養
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸芐*麥康凱配套試劑SR0520用于致病性嗜水氣單胞菌的選擇性分離培養(SN/T0750)

Agar B 瓊脂B 500g incubation media Agar B 瓊脂B 500g

五通橋毛霉 抗菌防腐劑檢測,藥效試驗,質量控制菌株,產生鼠李糖脂表面活性劑 /

ColiformMedium(Japan)

PentaneAmidine

雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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