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通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存

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更新時間:2017-07-17 13:53:29瀏覽次數:201次

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通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存詳細說明書:

通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
23-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt 100 ug     6-oxo-9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-23-dinor-prost-13E-en-1-oic acid sodium salt 23-dinor-6-keto PGF1α sodium salt); 23-dinor-6-keto Prostaglandin F1α sodium salt

Galangin 25 mg     3,5,7-Trihydroxyflavone|NSC 407229 3,5,7-trihydroxy-2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one

*-EDTA溶液2.5%10X)(100ML     Trypsin-EDTA Solution 2.5% 10X), Contains 2.5% trypsin and 8.5 g/L sodium chloride. Porcine parvovirus and mycoplasma tested.

BX-795 50 mg     N-[3-[[5-iodo-4-[[3-[2-thienylcarbonylamino]propyl]amino]-2-pyrimidinyl]amino]phenyl]-1-pyrrolidinecarboxamide BX-795

Hydroxymethyl Uracil 1 g     5-hydroxymethyl-241H3H-pyrimidinedione Hydroxymethyl Uracil

Reprogramming Cocktail Set II 1000X     StemBoost Reprogramming Cocktail Set II 1000X), Sterile-Filtered
MPO Assay Buffer 1 ea     MPO Assay Buffer

Cambinol     Cambinol 5 mg

+-CP 47497 solution 25 mg     2[1R3S-3-hydroxycyclohexyl]-5-2-methyloctan-2-ylphenol +-CP 47497 solution

17-trans Prostaglandin E3 25 ug     17-trans PGE3 9-oxo-11α,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid

JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5 1 mg     5-3-4-chloro-1-naphthoyl-1H-indol-1-yl-24567-d5pentanoic acid JWH 398 N-5-carboxypentyl metabolite-d5 JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5

Prostaglandin D Synthase -hematopoietic-type; mouse recombinant) (50 ug)     Hematopoietic-PGDS|H-PGDS, Prostaglandin D Synthase -hematopoietic-type; mouse recombinant)
Precoated Mouse Anti-Rabbit IgG EIA 96-Well Solid Plate 5 ea     Precoated Mouse Anti-Rabbit IgG EIA 96-Well Solid Plate

Pyrimetxamine     Darapram|Daraprim|Khloridin|NSC 3061 5,4-chloropxenyl-6-etxyl-2,4-pyrimidinediamine

ROS Brite HPF     ROS Brite HPF

Linezolid 10 mg     N-[[5S-3-[3-fluoro-4-4-morpholinylpxenyl]-2-oxo-5-oxazolidinyl]metxyl]-acetamide PNU 100766|Zyvox Linezolid

Palmitoyl Ethanolamide 100 mg     N-2-xy7noxyetxyl-hexadec* PEA|Palmidrol Palmitoyl Ethanolamide

4-Benzylpiperazin-1-yl)(2-isopentylaminopyridine-3-ylmetxanone     NSI-189
BBEAgar

梭菌強化培養基 厭氧菌的培養計數,尤其是食品和臨床樣品中的梭菌 500g incubation media 梭菌強化培養基 厭氧菌的培養計數,尤其是食品和臨床樣品中的梭菌 500g

蔥頭伯克氏菌 TF120復壯株,產堿性水溶性核甘類抗生素。 /

0.500ml/瓶用于樣品的制備和稀釋

AntibioticAgar
菌種保存培養基250g用于常用細菌斜面傳代及室溫保存

Plate count skim milk agar平板計數脫脂乳瓊脂 1.15338.0500 MERCK默克 incubation media Plate count skim milk agar平板計數脫脂乳瓊脂 1.15338.0500 MERCK默克

Skirrow瓊脂 250g 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(GBISO),每100mL基礎培養基需添加2支配套試劑。(SR0330)

無血清培養基Serumfreemedium

緩沖動力-鹽培
通用型全基因組擴增試劑盒30 次保存V-P半固體瓊脂250g生化培養基,用于細菌V-P試驗(SN標準)

Actinomycetesculturemedium

茜素-β-半乳糖苷瓊脂 Aliz-gal Agar 250 用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(GB/T)

Miller培養基250g/瓶用于植物組織培養incubationmediaMiller培養基250g/瓶用于植物組織培養

100mlGN增菌液均質袋 10/ 用于志賀氏菌前增菌培養

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