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更新時間:2017-07-17 13:54:32瀏覽次數(shù):173次
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石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片詳細說明書:
2,3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α (sodium salt) (1 mg) 6-oxo-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-2,3-dinor-prost-13E-en-1-oic acid, sodium salt; 2,3-dinor-6-keto PGF1α (sodium salt); 2,3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α (sodium salt)
Clonidine (hydrochloride) (1 g) Catapres|Kapvay|ST 155; N-(2,6-dichlorophenyl)-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride
胰蛋白胨(1KG) Tryptone, Tryptic digest of casein.
XLR12 (10 mg) (2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)[1-(4,4,4-trifluorobutyl)-1H-indol-3-yl]-methanone; XLR12
Hydroxymethyl Uracil (250 mg) 5-(hydroxymethyl)-2,4(1H,3H)-pyrimidinedione; Hydroxymethyl Uracil
Reprogramming Cocktail Set II (1000X) StemBoost Reprogramming Cocktail Set II (1000X), Sterile-Filtered
Myeloperoxidase Control (1 ea) Myeloperoxidase Control
2,4-比啶二羧酸一水合物 2,4 pyridindicarboxylic acid, hydrate (1 g)
3-dodecanoyl-NBD Cholesterol (1 mg) 12-[(7-nitno-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-(3S,10R,13R)-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R)-6-methylheptan-2-yl)-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e; 3-C12-NBD Cholesterol; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol
XLR11 (exempt preparation) (1 mg) 5-fluoro ; (1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)methanone
JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5 (500 ug) 5-(3-(4-chloro-1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl-2,4,5,6,7-d5)pentanoic acid; JWH 398 N-(5-carboxypentyl) metabolite-d5; JWH 398 N-pentanoic acid metabolite-d5
Prostaglandin E2 FPIA Reagent - Red (400 dtn) PGE2 Fluorescence Polarization Immunoassay Reagent - Red, Prostaglandin E2 FPIA Reagent - Red
Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Solid Plate (5 ea) Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Solid Plate
Trimetxoprim (25 g) Trimpex; 5-[(3,4,5-trimetxoxypxenyl)metxyl]-2,4-pyrimidinediamine
DAX-J2 Red DAX-J2 Red
Leukotriene B4 Luminex Standard (1 ea) LTB4 Luminex Standard; Leukotriene B4 Luminex Standard
Palmitoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-hexadec*; PEA|Palmidrol; Palmitoyl Ethanolamide
7-metxoxy-4-((6-pxenyl-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)metxoxy)inoneoline AMG-208
中國藍瓊脂培養(yǎng)基2350g用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng)(GB4789.4-20B4789.40-2002和GB-9標準)...
碳瓊脂基礎 (CM0119) Oxoid incubation media 碳瓊脂基礎 (CM0119) Oxoid
淺灰鏈霉菌杭州變種 產(chǎn)抗真菌的*。 支/瓶
StandardINutrientAgar
XLD瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
SodiumluriteBrothBase
蔗糖胰蛋白胨肉湯 250(g) incubation media 蔗糖胰蛋白胨肉湯 250(g)
甲苯胺藍-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue-O-Dnase Agar 100克 用于核糖核酸酶測定
戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂incubationmedia戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素瓊脂
含225mL胰酪胨大豆多粘菌素肉湯均質(zhì)袋 10個/包 用于蠟樣芽孢桿菌的檢測
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片丙酸鹽(枯草芽孢桿菌)20支用于枯草芽孢桿菌生化試驗
A1培養(yǎng)基 A1 Medium 用于檢測水中的大腸菌US-EPA標準)
血液* Blood Enrichment Medium 250 用于從血液中分離病原菌
馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂250g/瓶用于椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗incubationmedia馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂250g/瓶用于椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗
改良麥康凱肉湯(CT-MAC) 250g 用于O157選擇性增菌培養(yǎng)
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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