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LAMP 擴增陽性對照50 次運輸

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更新時間:2017-07-17 13:56:52瀏覽次數:125次

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LAMP 擴增陽性對照50 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

LAMP 擴增陽性對照50 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
LAMP 擴增陽性對照50 次運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
LAMP 擴增陽性對照50 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
LAMP 擴增陽性對照50 次運輸詳細說明書:

6-keto Prostaglandin F1α 1 mg     6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid 6-keto PGF1α; 6-keto Prostaglandin F1α

Vitamin K3 250 g     Menadione|NSC 4170 2-methyl-1,4-nepxtxelenedione

鹽酸*(5GM     Vancomycin HCl 1404-93-9 MW 1485.71 590ug/mg

Rabeprazole sodium salt 50 mg     2-[[[4-3-methoxypropoxy-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole monosodium salt Aciphex

Hydroxy Linoleins 50 mg     Hydroxy Linoleins

Dithiothreitol     DTT
β-Hydroxybutyrate Standard 1 ea     β-Hydroxybutyrate Standard β-Hydroxybutyrate Standard

毛殼素     Chaetocin 200 ug

3-hexanoyl-NBD Cholesterol 500 ug     6-[7-nitno-213-benzoxadial-4-ylamino]-cholest-5-en-3-ol 3-C6-NBD Cholesterol 3-hexanoyl-NBD Cholesterol

ADB-PINACA N-5-hydroxypentyl metabolite 10 mg     N-1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl-1-5-hydroxypentyl-1H-indazole-3-carboxamide

 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5 1 mg     [1-5-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl]2233-tetramethylcyclopropyl-methanone-24567-d5 XLR11 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5  N-5-hydroxypentyl metabolite-d5

Stearidonic Acid methyl ester (25 mg)     Moroctic Acid methyl ester, Stearidonic Acid methyl ester, 6Z,9Z,12Z,15Z-octadecatetraenoic acid, methyl ester
High-Binding 96-Well Strip Plate 100 ea     High-Binding 96-Well Strip Plate

Biochanin A 250 mg     4-metxyl Genistein|5,7-dixy7noxy-4-metxoxyisoflavone|NSC 123538 5,7-dixy7noxy-3-4-metxoxypxenyl-4H-1-benzopyran-4-one

新型鈣離子熒光探針Fluo-8 鉀鹽     Fluo-8 potewwium salt

CAY10568 25 mg     Santinamide trimetxyl[pxenylcarbamoylmetxyl]-ammonium iodide

R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide 10 mg     N-2R-xy7noxypropyl-hexadec* RP-2ME R-Palmitoyl-2-metxyl Ethanolamide

N-metxyl-N-4-metxyl-5-sulfamoylthiazol-2-yl-2-4-pyridin-2-ylpxenylacetamide     BAY 57-1293
MKTTnBroth

鐵瓊脂 250g 用于產硫化氫細菌計數

霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250 用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)

改良LMX肉湯2ml/瓶用于同時快速檢測大腸桿菌、大腸菌群,24h內出結果incubationmedia改良LMX肉湯2ml/瓶用于同時快速檢測大腸桿菌、大腸菌群,24h內出結果

含*酶接觸皿培養基平板(6.5cm) 10/ 用于環境、器皿、設備和表面的無菌檢測
EB增菌液凍干配套試劑SR0090支添加于225ml(0260EB增菌液。

Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid incubation media Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid

繩狀青霉 溶菌試驗 /

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂250g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準)

AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
LAMP 擴增陽性對照50 次運輸緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基)2250g用于MRVP試驗

7551-prf MCDM-prf 間充質干細胞軟骨細胞分化培養基 500 ml incubation media 7551-prf MCDM-prf 間充質干細胞軟骨細胞分化培養基 500 ml

亞西酸鹽*增菌液(SC) 300ml/*10 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(GBSN標準)

ToluidineBlueDNAseAgar

HistamineproducingbacteriaMedium

LAMP 擴增陽性對照50 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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