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T7 體外轉錄試劑盒50 次保存

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更新時間:2017-07-17 14:00:25瀏覽次數:147次

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T7 體外轉錄試劑盒50 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

T7 體外轉錄試劑盒50 次保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
T7 體外轉錄試劑盒50 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
T7 體外轉錄試劑盒50 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
T7 體外轉錄試劑盒50 次保存詳細說明書:

T7 體外轉錄試劑盒50 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Δ17-6-keto Prostaglandin F1α 500 ug     6-oxo-9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prosta-13E17Z-dien-1-oic acid ω-3 6-keto PGF2α; Δ17-6-keto Prostaglandin F1α

Amodiainonee 50 mg     Camoinonee|Flavoinonee|NSC 13453|SN 10751 4-[7-chloro-4-inoneolinylamino]-2-[diethylaminomethyl]-phenol

酵母提取物(1KG     Yeast Extract 8013-01-3

FUB-PB-22 10 mg     inoneolin-8-yl-1-4-fluorobenzyl-1H-indole-3-carboxylate FUB-PB-22

Sclerotiorin 1 mg     7-acetyloxy-5-chloro-3-[1E3E5S-35-dimethyl-13-heptadien-1-yl]-7-methyl-6H-2-benzopyran-687H-dione Sclerotiorin

N-[2-[2-4-Methoxyphenylethenyl]-4-inoneazolinyl]-NN-dimethyl-13-propanediamine Dihydrochloride     CP-31398 Dihydrochloride
DPP Assay Substrate 1 ea     DPP Substrate DPP Assay Substrate

銀杏酸     Ginkgolic acid 5 mg

Neurodezine 10 mg     2-[5-3-chlorophenyl-2-furanyl]-45-bis4-methoxyphenyl-1H-imidazole Neurodezine

4-fluoro PV9 hydrochloride 1 mg     4-fluoro α-POP|para-fluoro-PV9 1-4-fluorophenyl-2-pyrrolidin-1-yloctan-1-one, monohydrochloride

 N-pentanoic acid metabolite-d5 500 ug     5-3-2233-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl-1H-indol-1-ylpentanoic acid-24567-d5 XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5  N-pentanoic acid metabolite-d5

N-Palmitoyl Taurine (50 mg)     N-Palmitoyl Taurine, 2-[(1-oxohexadecyl)amino]-ethanesulfonic acid
96-Well Solid Plate Colorimetric Assay 100 ea     96-Well Solid Plate Colorimetric Assay

L-     6-deoxy-L-Galactose 6-deoxy-L-galactose

鈣離子指示探針Cal-520FF 鉀鹽     Cal-520FF potewwium salt

Lutein 500 ug     E 161b|FloraGLO|Xanthophyll 6R-β,ε-carotene-3R,3R-diol

Phytanic Acid 25 mg     371115-tetrametxylhexadecanoic acid Phytanic Acid

trans-4-[[5S-5-[[[35-bistrifluorometxylpxenyl]metxyl]2-metxyl-2H-tetrazol-5-ylamino]-2345-tetraxy7no-79-dimetxyl-1H-1-benzazepin-1-yl]metxyl]- cyclohexanecarboxylic acid LY2484595     Evacetrapib
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)2222g用于水或食品中大腸菌群平板菌落計數(GB4789.3-2002)

脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (CM0035) Oxoid incubation media 脫氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂 (CM0035) Oxoid

苜蓿根瘤菌 產脂肪酶 /

mTSBBrothWithNovobiocin

PPLOAgar
0.0每支添加于HB4086

Combinednitrogen-fixingbacteriamedium

布氏肉湯 Brucella Broth 250 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準)

細菌保存培養基250g/瓶用于菌種培養與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)incubationmedia細菌保存培養基250g/瓶用于菌種培養與保存,可制備菌種保存斜面(pH7.3)

Baird-ParkerAgarBase
T7 體外轉錄試劑盒50 次保存基酸脫羧酶試驗基礎培養基22090250g供鑒別腸道菌屬能否產生基酸脫羧酶用

7221-prf PADM-prf 前脂肪細胞分化培養基 500 ml incubation media 7221-prf PADM-prf 前脂肪細胞分化培養基 500 ml

BrilliantGreenLactoseBileBroth

亞碲酸鈉肉湯培養基基礎250g用于*的增菌培養。每培養基需另加入鈉1ml

STAA培養基 250g 用于熱死環絲菌的分離培養。

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