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m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存

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更新時間:2017-07-17 14:02:52瀏覽次數:170次

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m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存詳細說明書:

615-diketo-1314-dihydro Prostaglandin F1α 500 ug     615-dioxo-9α,11α-dihydroxy-prostan-1-oic acid 615-diketo-1314-dihydro PGF1α; 615-diketo-1314-dihydro Prostaglandin F1α

MMP Inhibitor II 1 mg     Matrix Metalloproteinase Inhibitor II|NHDDPC|PG 117025|PGE 4410186 hexahydro-N-hydroxy-1,3-bis[4-methoxyphenylsulfonyl]-5,5-dimethyl-2-pyrimidinecarboxamide

酵母提取物溶液(100ML     Yeast Extract Solution 25% yeast extract solution. Sterile filtered.

Concanavalin A 50 mg     Concanavalin A

nitnotyrosine 1 g     3-nitno-L-tyrosine nitnotyrosine

8- Bromoadenosine- 3’, 5- cyclic monophosphate cyclic 8- bromoadenosine- 3’, 5- monophosphate 8- bromoadenosine- 3’, 5-Monophosphate     8-Br-cAMP
SMase Alkaline Phosphatase 1 ea     SMase Alkaline Phosphatase

Aurora激酶抑制劑 ZM-447439     ZM-447439 1 mg

trans-Zeatin 10 mg     2E-methyl-4-9H-purin-6-ylamino-2-buten-1-ol trans-Zeatin

4-methoxy PV9 hydrochloride 10 mg     4-MeO PV9|4-methoxy α-POP|para-methoxy PV9 1-4-methoxyphenyl-2-pyrrolidin-1-yloctan-1-one, monohydrochloride

BB-22 3-carboxyindole metabolite 10 mg     1-cyclohexylmethyl-1H-indole-3-carboxylic acid BB-22 3-carboxyindole metabolite

ω-3 Arachidonic Acid methyl ester (50 mg)     ω-3 Arachidonic Acid methyl ester, 8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic acid, methyl ester
96-Well Strip Plate black 1 ea     96-Well Strip Plate black

Blonanserin     AD5423|Lonasen 2-4-etxyl-1-piperazinyl-4-4-fluoropxenyl-5,6,7,8,9,10-hexaxy7no-cycloocta[b]pyridine

pH熒光探針Protonex Red 600     Protonex Red 600

D-α-xy7noxyglutaric Acid wo7ium salt 25 mg     D-2-HG|D-2-xy7noxyglutaric Acid 2R-xy7noxy-pentanedioic acid, diwo7ium salt

9E),11E-Conjugated Linoleic Acid 100 mg     9E11E-octadecadienoic acid 9E11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangolds acid 9E),11E-Conjugated Linoleic Acid

N-Cyclohexyl-N-metxyl-4-12-dixy7no-2-oxo-6-inoneolyloxybutyramide     Cilostamide
水稻赤霉菌培養基250g用于水稻中赤霉菌培養

脫脂奶粉 用于制備微生物培養基。該類培養基一般用于保存和增殖乳酸菌 500g incubation media 脫脂奶粉 用于制備微生物培養基。該類培養基一般用于保存和增殖乳酸菌 500g

地衣芽孢桿菌 產抗生素 /

HE瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離培養

DTM培養基 250g 用于食品中真菌的培養
AcidBorth

LPM瓊脂 LPM Agar 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)(FDA標準)

Hektoen瓊脂培養基 Hektoen Enteric Agar 250 用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養

細菌總數顯色培養基250用于快速、準確檢測細菌總數,培養24小時,細菌顯紅色incubationmedia細菌總數顯色培養基250用于快速、準確檢測細菌總數,培養24小時,細菌顯紅色

腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂) 250g 用于食品和水中腸球菌的計數。
m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存SC瓊脂基礎250g用于產氣莢膜梭菌的計數和培養,需天極D-環絲酸和50%卵黃乳液(ISO標準)

7.5肉湯 7.5% Sodium Chloride Broth 用于*的增菌培養(GB標準)

類桿菌-膽汁-七葉甙(BBE)瓊脂 BBE Agar 250 用于脆弱擬桿菌群的分離培養

馬鈴薯蔗糖瓊脂250g/瓶用于真菌的培養incubationmedia馬鈴薯蔗糖瓊脂250g/瓶用于真菌的培養

DesoxycholaactoseAgar

m7G(5´)ppp(5´)A 帽結構類似物25 OD保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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