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NTP 溶液,10mM0.5mL保存

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更新時間:2017-07-17 14:05:26瀏覽次數:157次

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NTP 溶液,10mM0.5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

NTP 溶液,10mM0.5mL保存詳細說明書:

NTP 溶液,10mM0.5mL保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
NTP 溶液,10mM0.5mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
NTP 溶液,10mM0.5mL保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
NTP 溶液,10mM0.5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1α 10 mg     9alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-8beta。)-prost-13E-en-1-oic acid 8-epi PGF1α; 8-iso Prostaglandin F1α

R-Prunasin 5 mg     (αR-

超濾酵母提取物(500GM     Yeast Extract Ultra Filtered 8013-01-3

Digitonin 500 mg     2α,3β,5α,15β,25R-215-dihydroxyspirostan-3-yl O-β-D-glucopyranosyl-13-O-β-D-galactopyranosyl-12-O-[β-D-xylopyranosyl-14-β-D-galactopyranoside Digitin|NSC 23471|NSC 237417 Digitonin

nitnotyrosine BSA 200 ug     Peroxynitnite-treated BSA nitnotyrosine BSA

Q-LEOMe-HDOMe-OPh inoneolyl-Leu-GluOMe-His-AspOMe-OPh     Caspase-9 Inhibitor Q-LEHD-OPh
SMase Acid Solution 1 ea     SMase Acid Solution

乙酰化組蛋白H4K16多肽     Acetyl Histone H4K16 Peptide 200 ul

Fumonisin B2 1 mg     11-[1S2R-1-[2S9R11S12S-12-amino-911-dihydroxy-2-methyltridecyl]-2-[1R-1-methylpentyl]-12-ethanediyl]ester-123-propanetricarboxylic acid Fumonisin B2

HPOB 5 mg     4-[hydroxyaminocarbonyl]-N-2-hydroxyethyl-N-phenyl-benzeneacetamide

5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite 5 mg     1-5-fluoropentyl-1H-indole-3-carboxylic acid 5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite

Stearidonic Acid ethyl ester (25 mg)     Ethyl Stearidonate|Moroctic Acid ethyl ester, Stearidonic Acid ethyl ester, 6Z,9Z,12Z,15Z-octadecatetraenoic acid, ethyl ester
SPE Cartridges Mixed Bed 10 ea     Bond Elut Certify II SPE Cartridges Mixed Bed

1,3-Dilinoleoyl-rac-glycerol 500 mg     1,3-Dilinolein|1,3-Glyceryl dilinoleate 1,1-2-xy7noxy-1,3-propanediyl ester-9Z,12Z-octadecadienoic acid

RatioWorks PDMPO 右旋糖苷     RatioWorks PDMPO Dextran

2-metxoxy ketemine xy7nochloride 10 mg     2-2-metxoxypxenyl-2-metxylamino-cyclohexanone, monoxy7nochloride

Oleamide 100 mg     9Z-octadecenamide cis-9-Octadecenamide Oleamide

1-4-metxoxypxenyl-2-metxyl-3-nitH-indol-6-ol     ID-8
改良月桂基鹽胰蛋白月示肉湯(MLST)2220g用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗的增菌和分子生物學檢驗方法(PCR)選擇性增菌

彎曲菌無血選擇瓊脂基礎 (CM0739) Oxoid incubation media 彎曲菌無血選擇瓊脂基礎 (CM0739) Oxoid

威爾酵母 藥用菌 /

MEE肉湯250g用于腸道菌的選擇性增菌培養(SN標準)

十二烷基鈉瓊脂 250g 用于鼠疫桿菌抗噬菌體培養
BufferedPower-nitratemedium

乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(GB標準)

胰蛋白胨大豆快綠瓊脂 Tryptic Soy Fast Green Agar 250 濾膜細菌總數的測定和分離培養

現隱肉湯用于水中大腸菌群計數(US-EPA方法)incubationmedia現隱肉湯用于水中大腸菌群計數(US-EPA方法)

UreaseAgarBase
NTP 溶液,10mM0.5mL保存Koser氏枸椽酸鹽肉湯2200g用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗

6201-prf CMM-prf 心肌細胞培養基 500 ml incubation media 6201-prf CMM-prf 心肌細胞培養基 500 ml

Sabouraud’sGlucoseAgarMedium

DNA酶瓊脂于核糖核酸酶檢測

BM液體培養基 250g 用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養

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