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UTP 溶液,2.5mM2mL保存

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更新時間:2017-07-17 14:09:09瀏覽次數:243次

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UTP 溶液,2.5mM2mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

UTP 溶液,2.5mM2mL保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
UTP 溶液,2.5mM2mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
UTP 溶液,2.5mM2mL保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
UTP 溶液,2.5mM2mL保存詳細說明書:

UTP 溶液,2.5mM2mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1β 10 mg     9beta。,11alpha。,15S-trihydroxy-8beta。)-prost-13E-en-1-oic acid 8-epi-9β-PGF1α|8-iso PGF1β; 8-iso Prostaglandin F1β

2-Methylami-phenylbutane hydrochloride 5 mg     α-ethyl-N-methyl-Benzeneethanamine α-ethyl-N-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride

*-EDTA溶液0.05%1X)(100ML     Trypsin-EDTA Solution 0.05% 1X), Contains 0.05% trypsin and 1mM EDTA in Hanks Balanced Salt Solution without calcium and magnesium. Sterile filtered. Porcine parvovirus and mycoplasma tested.

HA-100 hydrochloride 10 mg     5-1-piperazinylsulfonyl-isoquinoline dihydrochloride C-1 HA-100 hydrochloride

γ-CEHC 5 mg     34-dihydro-6-hydroxy-278-trimethyl-2H-1-benzopyran-2-propanoic acid 278-trimethyl-2-(β-Carboxy-Ethyl-6-Hydroxychroman|GTM|γ-Tocopherol Metabolite γ-CEHC

2S3R-3-34-Difluorophenyl-2-4-fluorophenyl-4-hydroxy-N-((3S-2-oxo-5-phenyl-23-1H-benzo[e][14]diazepin-3-ylbutyramide]     Compound 34
HDAC8 Trichostatin A 1 ea     HDAC8 Trichostatin A

*標記單甲基化組蛋白H3K4多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K4 Peptide 200 ul

thio-m-Toluthioamide 1 g     3-methyl-benzenecarbothioamide 3-thioamide thio-m-Toluthioamide

CCG-203971 50 mg     N-4-chlorophenyl-1-[3-2-furanylbenzoyl]-3-pipeni7inecarboxamide

PB-22 N-4-hydroxypentyl metabolite 1 mg     quinolin-8-yl 1-4-hydroxypentyl-1H-indole-3-carboxylate PB-22 N-4-hydroxypentyl metabolite

1-Palmitoyl-2-linoleoyl PE (5 mg)     PLPE|Phosphatidyl Ethanolamine (1-palmitoyl, 2-linoleoyl), 1-Palmitoyl-2-linoleoyl PE, (1R)-1-[[[(2-aminoethoxy)hydroxyphosphinyl]oxy]methyl]-2-[(1-oxohexadecyl)oxy]ethyl ester, 9Z,12Z-octadecadienoic acid
Foil Plate Covers 25 ea     Foil Plate Covers

Nε-     CML N6-carboxymetxyl-L-lysine

硫醇化合物藍色熒光探針Thiolite Blue AM     Thiolite Blue AM

Tenuazonic Acid 1 mg     AAC-toxin 3-acetyl-1,5-dixy7no-4-xy7noxy-5S-[1S-1-metxylpropyl]-2H-Pyrrol-2-one

13-Docosenamide 1 g     13Z-docosenamide Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide 13-Docosenamide

4-4-Benzofurazanyl-14-dixy7no-26-dimetxyl-35-pyridinedicarboxylic acid metxyl 1-metxylester diester     Isradipine
硅酸鹽細菌培養基(含瓊脂)250g用于硅酸鹽細菌的分離培養

微生物含量測試瓊脂(胰蛋白大豆瓊脂含*和吐溫80) 環境監測中的多種菌的計數 500g incubation media 微生物含量測試瓊脂(胰蛋白大豆瓊脂含*和吐溫80) 環境監測中的多種菌的計數 500g

多型孢毛霉 /

MFC瓊脂平板(9cm)用于大腸菌群的濾膜法檢測

YM瓊脂 250g 用于霉菌,酵母菌及耐酸菌的分離培養
BufferedListeriaEnrichmentBroth

菌種培養基 Strain Medium(for B.Cereus) 用于四環素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(SN標準)

聚山梨酯80培養基(需氧、厭氧菌) Tween80 Medium(Bacteria) 250 油劑的無菌試驗

小川氏培養基250g/瓶用于結核桿菌的藥敏試驗,也可用于結核桿菌的分離和培養,需添加甘油和全蛋液incubationmedia小川氏培養基250g/瓶用于結核桿菌的藥敏試驗,也可用于結核桿菌的分離和培養,需添加甘油和全
UTP 溶液,2.5mM2mL保存FWA淡水魚類瓊脂培養基250g用于淡水魚類腸道內細菌檢測

5L incubation media 5L

昆明鏈霉菌 產纖維素酶,釀造白酒。 /

PhosphateBufferedSaline

Sabouraud’sGlucoseAgarMedium

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