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GTP 溶液,2.5mM2mL圖片

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更新時間:2017-07-17 14:11:42瀏覽次數:194次

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GTP 溶液,2.5mM2mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

GTP 溶液,2.5mM2mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片詳細說明書:

8-iso Prostaglandin F1β 50 mg     9。beta。,11。alpha。,15S-trihydroxy-8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid 8-epi-9β-PGF1α|8-iso PGF1β; 8-iso Prostaglandin F1β

3-CAF 1 mg     naphthalen-2-yl 1-2-fluorophenyl-1H-indazole-3-carboxylate

杜氏磷酸緩沖液(500ML     Dulbeccos PBS, Without calcium and magnesium. Sterile filtered.

HA-100 hydrochloride 5 mg     5-1-piperazinylsulfonyl-isoquinoline, dihydrochloride; C-1 HA-100 hydrochloride

Trichostatin A 1 mg     7-[4-dimethylaminophenyl]-N-hydroxy-46R-dimethyl-7-oxo-2E4E-heptadienamide; TSA; Trichostatin A

Q-IEOMe-TDOMe-OPh; Quinolyl-Ile-GluOMe-Thr-AspOMe-OPh     Caspase-8 Inhibitor Q-IETD-OPh
HDAC8 Developer 1 ea     HDAC8 Developer

二甲基化組蛋白H3K4多肽     Dimethyl Histone H3K4 Peptide 200 ul

thio-p-Toluamide 1 g     4-methyl-benzenecarbothioamide 4-thioamide thio-p-Toluamide

1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-PC chloride 100 mg     1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-Phosphocholine|1,2-EDPPC|DPePC; 4-ethoxy-N,N,N-trimethyl-10-oxo-7R-[1-oxohexadecyloxy]-4-oxide-3,5,9-trioxa-4-phosphapentacosan-1-aminium, monochloride

PB-22 N-4-hydroxypentyl metabolite 5 mg     quinolin-8-yl 1-4-hydroxypentyl-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 N-4-hydroxypentyl metabolite

CAY10493 (5 g)     4-[1-(4-tert-Butoxycarbonyl-benzyl)-1H-indol-4-yl]-Piperezine-1-carboxylic acid tert-butyl ester, CAY10493, 4-[1-(4-tert-butoxycarbonyl-benzyl)-1H-indol-4-yl]-piperezine-1-carboxylic acid tert-butyl ester
enponete Buffer 1 ea     wo7ium enponete; enponete Buffer

Nε-     CML N6-carboxymetxyl-L-lysine

藍色活細胞熒光探針Cytol Blue     Cytol Blue

10-nitnooleate-d17 500 ug     10-nitnooleic Acid-d17|10-nitno-9-trans-Octadecenoic Acid-d17 10-nitno-9E-octadecenoic-11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-d17 acid

13-Docosenamide 5 g     13Z-docosenamide; Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide; 13-Docosenamide

2-4-Benzylpxenoxy-N-1-benzylpiperidin-4-ylacetamide     AdipoRon
NitrateSalinePeptoneWaterMedium

維生素B12測定用培養基 100(g) incubation media 維生素B12測定用培養基 100(g)

胰蛋白胨水肉湯 Tryptone Broth 250 靛基質試驗

產毒培養基250用于青霉、曲霉的產毒培養incubationmedia產毒培養基250用于青霉、曲霉的產毒培養

H-頂層培養基 250g 用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)
改良MSRV培養基(定量)250g用于沙門氏菌的分離培養

氣單胞菌培養基基礎 250g 用于氣單胞菌分離培養

XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250 用于食品中致病菌,特別是沙門氏菌分離培養(Merck方法)

小牛浸液肉湯250g/瓶用于苛養菌的培養incubationmedia小牛浸液肉湯250g/瓶用于苛養菌的培養

RoseBengalMedium
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片弗拉特氏菌培養基250g用于弗拉特氏菌平板計數

5L incubation media 5L

類球紅細菌(球形紅桿菌) /

EC肉湯(含小倒管)20/包用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定

MannitolSaltAgarMedium

GTP 溶液,2.5mM2mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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