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CTP 溶液,100mM0.25mL運輸

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更新時間:2017-07-17 14:12:10瀏覽次數:171次

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CTP 溶液,100mM0.25mL運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

CTP 溶液,100mM0.25mL運輸詳細說明書:

CTP 溶液,100mM0.25mL運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
CTP 溶液,100mM0.25mL運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
CTP 溶液,100mM0.25mL運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
CTP 溶液,100mM0.25mL運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Prostaglandin F1β 1 mg     9。beta。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β-PGF1α|PGF1β; Prostaglandin F1β

3-CAF 10 mg     naphthalen-2-yl 1-2-fluorophenyl-1H-indazole-3-carboxylate

杜氏磷酸緩沖液(10LT     Dulbeccos PBS Without calcium and magnesium.

HA-100 hydrochloride 50 mg     5-1-piperazinylsulfonyl-isoquinoline, dihydrochloride; C-1; HA-100 hydrochloride

Trichostatin A 10 mg     7-[4-dimethylaminophenyl]-N-hydroxy-4,6R-dimethyl-7-oxo-2E,4E-heptadienamide; TSA; Trichostatin A

N-Phenyl-4-quinolin-2-ylmethylpiper-1-carboxamide     FAAH Inhibitor, PF-622
HDAC8 Fluorophore 1 ea     HDAC8 Fluorophore

*標記二甲基化組蛋白H3K4多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K4 Peptide 100 ul

thio-p-Toluamide 250 mg     4-methyl-benzenecarbothioamide; 4-thioamide; thio-p-Toluamide

1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-PC chloride 25 mg     1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-Phosphocholine|1,2-EDPPC|DPePC; 4-ethoxy-N,N,N-trimethyl-10-oxo-7R-[1-oxohexadecyloxy]-4-oxide-3,5,9-trioxa-4-phosphapentacosan-1-aminium, monochloride

PB-22 N-5-hydroxypentyl metabolite 1 mg     quinolin-8-yl 1-5-hydroxypentyl-1H-indole-3-carboxylate PB-22 N-5-hydroxypentyl metabolite

8-Iso methanamine -hydrochloride) (1 g)     8-Iso methanamine -hydrochloride), 8-Isomethanamine, dihydrochloride
enponete Buffer 5 ea     wo7ium enponete; enponete Buffer

Nε-     CML; N6-carboxymetxyl-L-lysine

綠色活細胞熒光探針Cytol Green     Cytol Green

I-BET762 1 mg     GSK525762A S-2-6-4-chloropxenyl-8-metxoxy-4H-benzo[f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-4-yl-N-etxylacetamide

2-Fluoropalmitic Acid 10 mg     2-fluorohexadecanoic acid; 2-Fluoropalmitic Acid

((1S,2S4R-4-4-(((S-2,3-dixy7H-inden-1-ylamino-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-2-xy7noxycyclopentylmetxyl sulfamate     MLN-4924
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)250g用于霉菌,酵母菌計數

衛矛醇半固體瓊脂 10(g) incubation media 衛矛醇半固體瓊脂 10(g)

西蒙氏枸櫞酸鹽發酵管 西蒙氏枸櫞酸鹽發酵管 20 BR

Fraser培養基250用于李氏菌的增菌培養(MERCK標準)incubationmediaFraser培養基250用于李氏菌的增菌培養(MERCK標準)

DNA酶甲基綠瓊脂基礎 100 用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(GB標準)
TryptoseBrothBase

MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500 MERCK默克 incubation media MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500 MERCK默克

含鐵牛奶培養基 250g 用于飲用天然礦泉水中產氣莢膜梭菌的測定。(GB/T 8538-2008)

小鼠胚胎成纖維細胞*培養基Mouseembryonicfibroblastsintothemedium

營養瓊脂(NA) 250g 細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代
CTP 溶液,100mM0.25mL運輸念珠菌顯色培養基CRM000ml/瓶用于念珠菌特別是白色念珠菌的選擇性分離和初步鑒別

5L incubation media 5L

栗酒裂殖酵母 模式菌株 /

LactoseBileFermentBroth

麥康凱瓊脂培養基(MacC) 250g 用于腸道致病菌的選擇性分離培養

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