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無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存

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更新時間:2017-07-17 14:19:50瀏覽次數:153次

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無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
13,14-dihydro Prostaglandin F1α 10 mg     9。alpha。,11alpha。,15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid; PGFα|13,14-dihydro PGF1α; 13,14-dihydro Prostaglandin F1α

MMB018 10 mg     methyl 1-pentyl-1H-indole-3-carbonyl-L-valinate

三羥基氨甲烷鹽酸鹽(5KG     TRIS Hydrochloride, 1185-53-1; MW 157.8

Tetrodotoxin Citrate 1 mg     4R4aR,5R,7S,9S,10S,10aR11S,12S-2-ami,4,4a,59,10-hexahydro-12-hydroxymethyl-5,9:710a-dimethanol-10aH-[1,3]dioxocino[6,5-d]pyrimidine-47,10,1112-pentol, citrate; TTX Tetrodotoxin Citrate

Prostaglandin A1 methyl ester 10 mg     15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGA1 methyl ester; Prostaglandin A1 methyl ester

57,4-Trihydroxyflavanone; 2,3-dihydro-57-dihydroxy-2-4-hydroxyphenyl-4H-1-benzopyran-4-one NGEN     Naringenin
G6PDH Cofactor 1 ea     G6PDH Cofactor

*標記組蛋白H3多肽(69-89     Biotinylated Histone H3 Peptide residues 69-89 100 ul

Thiamet G 5 mg     2-ethylamino-3aR,6S7R7aR-tetrahydro-5R-hydroxymethyl-5H-pyrano[3,2-d]thiazole-6,7-diol Thiamet G

PLX4720 10 mg     Raf Kinase Inhibitor V N-[3-[5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-ylcarbonyl]-2,4-difluorophenyl]-1-propanesulfonamide

β-Glycerophosphate sodium salt hydrate 50 g     2-dihydrogen phosphate-123-propanetriol disodium salt, pentahydrate; β-Glycerophosphate sodium salt hydrate

15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (50 mg)     15-keto PGE2, 15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9,15-dioxo-11α-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
Ellmans Reagent 100 dtn     Ellmans Reagent

1,2-O-Dihexadecyl-rac-glycerol 500 mg     2,3-bishexadecyloxy-1-propanol

yenine 3。5馬來酰亞胺 [相當于Cy3。5馬來酰亞胺]     yenine 3。5 Maleimide [equivalent to Cy35 Maleimide]

Donepezil 100 mg     23-dixy7no-56-dimetxoxy-2[[1-pxenylmetxyl-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one; Aricept ; Donepezil

5S),6R-Lipoxin A4 100 ug     5S6R15S-trixy7noxy-7E,9E,11Z13E-eicosatetraenoic acid 5S),6R),15S-TriHETE|5S),6R-LXA4; 5S),6R-Lipoxin A4

N6-metxyl-R-roscovitine; Amyloid-β Forty-Two Inducer 4     Aftin-4
維生素K加入HB0398

纖維二糖-多粘菌素E(CC)瓊脂 用于創傷弧菌分離培養基

Lambda Broth Lambda Broth 100 BR

酵母膏-麥芽膏瓊脂ISPMedium2(YeastExtractMaltExtractAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養鑒定incubationmedia酵母膏-麥芽膏瓊脂ISPMedium2(YeastExtractMaltExtractAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養鑒定

大腸桿菌顯色培養基 1000ml 用于快速、準確檢測大腸桿菌,培
新生霉素/*5

Silicatebacteriamedium(withoutAgar)

醋酸鹽瓊脂 Acetate Agar 250 用于細菌醋酸鹽試驗

溴甲酚紫葡萄糖肉湯250g/瓶用于低酸性罐頭食品無菌檢驗incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖肉湯250g/瓶用于低酸性罐頭食品無菌檢驗

SorbitolMaconkeyAgarBase
無脊椎動物種屬鑒定 PCR Mix100 次保存氣單胞菌培養基添加劑5支每支添加劑加入氣單胞菌培養基基礎

50190 胰蛋白胨 BR 400g 酪蛋白*水解而成的胨,培養基原材料 incubation media 50190 胰蛋白胨 BR 400g 酪蛋白*水解而成的胨,培養基原材料

粉紅木霉 /

WagstsumaBloodAgarBase

MaltExtractAgar

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