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真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-07-18 12:14:53瀏覽次數(shù):150次

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真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

 

真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
19R-hydroxy Prostaglandin F1α 100 ug     9alpha。,11alpha。,15S19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid 19R-hydroxy PGF1α; 19R-hydroxy Prostaglandin F1α

Metolazone 50 mg     SR 720-22|Zaroxolyn 7-chloro-1,2,3,4-tetrahydro-2-methyl-3-2-methylphenyl-4-oxo-6-quinazolinesulfonamide

真菌抗生素溶液(100X)(6X100ML     Antibiotic-Antimycotic Solution 100X), Contains 10000 units of penicillin 10000ug streptomycin and 25ug amphotericin B in a 0.85% saline solution. Effective against bacteria fungi and yeasts. Sterile-filtered solution.

Sp-Cyclic AMPS sodium salt 1 mg     cyclic 3’,5-[hydrogen S-phosphorothioate] adenosine monosodium salt Sp-cAMPS Sp-Cyclic AMPS sodium salt

Eicosapentaenoic Acid methyl ester 10 mg     5Z8Z11Z14Z17Z-eicosapentaenoic acid methyl ester EPA methyl ester Eicosapentaenoic Acid methyl ester

1-2-Methylpropyl-1H-imidazo[45-c]quinolin-4-amine R-837     Imiquimod
Corey Lactone Aldehyde Benzoate 1 g     [3aR-3aalpha。,4alpha。,5beta。,6aalpha。)]5-benzoyloxyhexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde Corey Lactone Aldehyde Benzoate

*標(biāo)記*基化組蛋白H3K9多肽     Biotinylated Trimethyl Histone H3K9 Peptide 100 ul

--AS 115 1 mg     2-fluorophenyl-2-(((1R2S-2-butoxymethylcyclohexylmethoxyethylcarbamate --AS 115

Boldenone Cypionate 10 mg     17β-hydroxy-androsta-1,4-dien-3-one cyclopentanepropionate

Efavirenz 5 mg     4S-6-chloro-4-2-cyclopropylethynyl-14-dihydro-4-trifluoromethyl-2H-31-benzoxazin-2-one DMP 266|EFV|L-743726 Efavirenz

N-Docosanoyl Taurine (50 mg)     N-Docosanoyl Taurine, 2-[(1-oxodocosyl)amino]-ethanesulfonic acid
Half Volume 96-Well Solid Plate black 5 ea     Half Volume 96-Well Solid Plate black

A-443654 500 ug     αS-[[[5-3-metxyl-1H-indazol-5-yl-3-pyridinyl]oxy]metxyl]-1H-indole-3-ethanamine

yenine 55 雙酸 [相當(dāng)于Cy55 雙酸]     yenine 55 bis acid [equivalent to Cy55 bisacid]

Bisindolylmaleimide I 10 mg     3-[1-[3-dimetxylaminopropyl]-1H-indol-3-yl]-4-1H-indol-3-yl-1H-pyrrole-25-dione BIM I|GF 109203X|G

O-Arachidonoyl Ethanolamine xy7nochloride 1 mg     O-2-aminoetxyl-5Z8Z11Z14Z-eicosatetraenester monoxy7nochloride Arachidonic Acid-2-aminoetxyl-ester|O-AEA|Virodhamine O-Arachidonoyl Ethanolamine xy7nochloride

66-[33-Dimetxyl[11-bipxenyl]-44-diylbisazobis[4-amino- 5-xy7noxy-13-nepxtxelenedisulphonic acid] tetrawo7ium salt     Evans Blue Tetrawo7ium
馬尿酸鈉培養(yǎng)基250g用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

芽孢桿菌培養(yǎng)基 250g 用于芽孢桿菌平板計(jì)數(shù)

半固體動力培養(yǎng)基 Motility Test Medium(Semisolid) 250 用于動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等(SN標(biāo)準(zhǔn))

*卵黃培養(yǎng)基250g/瓶用于*計(jì)數(shù)(日本),每培養(yǎng)基中添加22incubationmedia*卵黃培養(yǎng)基250g/瓶用于*計(jì)數(shù)(日本),每培養(yǎng)基中添加221001

磷酸鹽緩沖液(PBSpH7.2) 9ml*20
MartinBroth,Modified

*瓊脂 250(g) incubation media *瓊脂 250(g)

蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基 蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基 250 蠟樣芽孢桿菌快速顯色分離培養(yǎng)

血液*250用于從血液中分離病原菌incubationmedia血液*250用于從血液中分離病原菌

V-PMedium,Modified
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸NTMMedium

50070 酵母浸膏 BR 500g 培養(yǎng)基原材料,含有豐富的B族維生素、氨基酸 incubation media 50070 酵母浸膏 BR 500g 培養(yǎng)基原材料,含有豐富的B族維生素、氨基酸

浮游球衣菌 食用 /

AmiesTransportMedium

YMMedium

真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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