使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 大鼠多巴胺神經元細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1304 |
商品介紹:
名稱 大鼠多巴胺神經元細胞 2.組織來源:腦組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠多巴胺神經元細胞分離腦組織;多巴胺神經元,即:胺能神經元,主要指含多巴胺的神經元,其細胞體主要分布在黑質、腳間核和丘腦下部等處。在這些區域多巴胺含量很高。多巴胺在機體內合成時以為原料。腦內的多巴胺主要是由黑質細胞來合成,這些多巴胺參與錐體外系統的活動,與軀體運動機能有密切關系。腦內多巴胺代謝失常時,可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine),是NA的前體物質,是下丘腦和腦垂體腺中的一種關鍵神經遞質,中樞神經系統中多巴胺的濃度受精神因素的影響,神經末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯系并相互作用,以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的神經原物質多巴胺(Dopamine),則直接影響人們的情緒。從理論上來看,增加這種物質,就能讓人興奮,但是它會令人上癮。多巴胺在前腦和基底神經節(Basal Ganglia)出現,基底神經節負責處理恐懼的情緒,但由于多巴胺的緣故,取代了恐懼的感覺,因此有很多人的上癮行為,都是因多巴胺而起的。 5.方法簡介: ()實驗室分離的大鼠多巴胺神經元細胞采用消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: ()實驗室分離的大鼠多巴胺神經元細胞經TH免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R209 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25% 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
瓊脂培養基J Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 250g
1瓶 HCC94[HCC941122]細胞株 HCC94[HCC941122] 低溫運輸和保存
LST發酵管(含小倒管) LST 10ml*20支/包
500U Tma 核酸內切 III Tma Endonuclease III -20℃保存
志賀氏菌顯色培養基 1000ml
250mg 赤 Gibberellic Acid (GA3) 室溫干燥保存
50T 花生PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-2?嵌?L?
大鼠多巴胺神經元細胞志賀氏菌增菌肉湯-新生 英文名稱:Shigella Broth 產品規格:250g 小鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒進口、組裝
尿素瓊脂(PH7.2) 英文名稱:Urease Agar Base 產品規格:250g 小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)免疫試劑盒進口、分裝
新生(125ug/支) 英文名稱: 產品規格:125ug/支*5 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)免疫試劑盒現貨供應
半固體營養瓊脂 英文名稱:Semisolid Nutrient Agar 產品規格:250g 小鼠心鈉肽(ANP)免疫試劑盒*直銷
麥康凱瓊脂(MAC) 英文名稱:MaConkey Agar 產品規格:250g 小鼠心肌轉錄因子GATA3 免疫試劑盒進口、組裝
紅煌綠瓊脂 英文名稱:Phenol Red Brilliant Green Agar 產品規格:250g 小鼠心肌營養素1(CT-1)免疫試劑盒進口、分裝
乳糖肉湯培養基 英文名稱:Lactose Broth Medium 產品規格:500g 小鼠心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒現貨供應
脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養基 英文名稱:Deoxycholate Citrate Agar Medium 產品規格:250g 小鼠心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒*直銷
志賀氏菌(BCT)增菌液 英文名稱: 產品規格:250g 小鼠腺苷高半胱(AHCY)免疫試劑盒進口、組裝
半固體瓊脂管 英文名稱: 產品規格:6ml*10支 小鼠腺病毒IgG抗體免疫試劑盒進口、分裝