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大鼠真皮成纖維細胞

參考價
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具體成交價以合同協議為準
  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-16
  • 廠商性質經銷商
  • 入駐年限10
  • 實名認證已認證
  • 產品數量8965
  • 人氣值295752
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公司客戶遍布大學、研究所、醫院、衛生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業等單位。


公司主推品牌: (進口、國產) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。





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貨號GOY-01X0982
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食物總抗氧
大鼠真皮成纖維細胞 產品詳情

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠真皮成纖維細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0982

商品介紹:

名稱 大鼠真皮成纖維細胞

2.組織來源:皮膚組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠真皮成纖維細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠真皮成纖維細胞采用先中性消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠真皮成纖維細胞Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R086

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

沙氏葡萄糖液體培養基(2015藥典)(顆粒)  250g 1.56-100 ng/mL 脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA試劑盒

1瓶 COC1細胞株 COC1 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human Leukocyte elastase inhibitor

即用型無菌管裝液體培養基   0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-2

500U 人類單鏈選擇性單功能-DNA糖基化 hSMUG1 -20

大鼠真皮成纖維細胞Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740)  磷酸化小板源性生因子受體-B抗體 規格: 0.1ml

48 T 酯測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

2 ug pTRE2 hyg pTRE2 hyg 低溫運輸,-20℃保存

沙氏葡萄糖肉湯(usp) Sabouraud-dextrose Broth 250g

10mL 戊二醛,25% 水溶液 Glutaraldehyde Solution    室溫保存

100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0  MES Buffer,0.5M,pH9.0  常溫保存

10 mg Hydroxystilbamidine  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

肝浸粉 Liver Infusion 100g

50T 口蹄疫病毒亞洲1型PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

2 ug pAAV-IRES-hrGFP pAAV-IRES-hrGFP 低溫運輸,-20℃保存

Beta galactosidase  β半糖苷抗體 規格: 0.2ml

2 ug pSUOER-retro-neo/GFP pSUOER-retro-neo/GFP 低溫運輸,-20℃保存

 


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