培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養瓶 | BJ-X96741 |
商品介紹:
名稱 RIN-m5F (大鼠胰島β細胞瘤細胞) 別稱RIN m5F; Rin-M-5F; Rin-m-5F; RINm-5F; RINm5F; RIN Cl-5F 組織來源胰腺/朗格漢斯胰島 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述RIN-m5F細胞是大鼠胰島細胞RIN-m的克隆,分泌胰島素及L型多巴脫羧酶;RIN-m5F細胞不產生生長激素抑制激素。 生物安全等級1 生長培養基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達情況insulin; L-dopa-decarboxylase |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽
RIN-m5F (大鼠胰島β細胞瘤細胞)20次 Southern Marker Oligo(DIG) 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Serum amyloid P-component
500mL Blotto-Tween in TBS with azide Blotto-Tween in TBS with azide 常溫保存 15.6-1000 pg/mL 血栓素B2(Thromboxane B2)ELISA試劑盒
1瓶 QGY-7703株 QGY-7703 低溫運輸和保存蛋白胨E進口、國產Gelatin Peptone250克BR
250g D- D-Mannitol 室溫干燥保存 78-5000 pg/mL 人D結合蛋白(DBP)ELISA試劑盒
2 ug pIRES-puro pIRES-puro 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D-aspartate oxidase
50次 柱式RNA純化試劑盒 Column RNAclean-Up 常溫保存,RNA洗脫液需要-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human 5-hydroxytryptamine receptor 1B
1mL 植物蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存 3.9-250 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein(a)
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基(顆粒) 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein-arginine deiminase type-2
25g N-2- -N’-2- 乙基磺酸鈉 HEPES,Sodium Salt 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP5
150 U 限制性內切NotI Restriction Endonuclease -20℃保存察氏培養基進口、國產Czapek Dox Agar250克用于酵母菌的培養
2 ug pTALETF_v2 (NI) pTALETF_v2 (NI) 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒