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產(chǎn)品名稱 | CHL (倉鼠肺細胞) |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X96380 |
商品屬性：
名稱 CHL (倉鼠肺細胞) 別稱Chinese Hamster Lung 種屬中國倉鼠 年齡（性別）1日齡 組織來源皮膚 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 背景描述CHL細胞廣泛應用于染色體異常測試。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達情況human tissue plasminog |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大鼠 APEX1 基因全長ORF克隆
大鼠 TRUB2 基因全長ORF克隆
大鼠 CYB5A 基因全長ORF克隆
大鼠 GPX2 基因全長ORF克隆
大鼠 NAT9 基因全長ORF克隆
大鼠 ATP5C1 基因全長ORF克隆
大鼠 TRAPPC5 基因全長ORF克隆
大鼠 PSMA7 基因全長ORF克隆
大鼠 RPL4 基因全長ORF克隆
大鼠 MFAP2 基因全長ORF克隆
CHL (倉鼠肺細胞)假單菌瓊脂基礎培養(yǎng)基/CN瓊脂 CN Agar 250g
EG培養(yǎng)基 EG Medium 250g波爾頓選擇性增菌肉湯進口、國產(chǎn)Bolton Selective Enrichment broth用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法)250
2mL 氨基磁珠 Magnetic beads,Amino 4℃密閉、豎直保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Protein FAM214A
1瓶 OVCaR-3株 OVCaR-3 低溫運輸和保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Myc box-dependent-interacting protein 1
100mL 茜素紅S染色試劑盒 Alizarin Red S Staining Kit 常溫保存
2 ug pPRIME-TET-GFP-FF3 pPRIME-TET-GFP-FF3 低溫運輸，-20℃保存PLET 瓊脂基礎進口、國產(chǎn)PLET Agar Base用于炭疽桿菌的分離鑒別250
100mL Biotin Solution（溶液）,0.02% Biotin Solution,0.02% 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人線粒體天冬谷載體同工型1(AGC1/SLC25A12)ELISA試劑盒
2 ug pACYC 184 pACYC 184 低溫運輸，-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人蛋白1調(diào)節(jié)亞基14B (PPP1R14B)ELISA試劑盒
24 T 乳酸脫氫測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存匹克氏肉湯基礎B進口、國產(chǎn)Pick，s Broth Base B250克一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗
MUG培養(yǎng)基 MUG Medium 100g顯色培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Staphylococcus Chromogenic Medium用于菌的顯色培養(yǎng)1000ml
100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷 TRIS(Tris（Hydroxymethyl）Aminomethane) 室溫干燥保存 0.312-20 ng/mL 人粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
