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ELISA實驗雙抗體夾心法操作步驟2022/10/24
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌...
解說PCR反應中的主要成份引物2022/10/17
PCR反應產(chǎn)物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關(guān)鍵。引物設(shè)計和選擇目的DNA序列區(qū)域時可遵循下列原則：1、引物長度約為16-30bp，太短會降低退火溫度影響引物與模板配對，...
組織蛋白酶A抗體鑒定2022/10/10
組織蛋白酶A抗體鑒定：1、抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免...
免疫細胞分離技術(shù) ?2022/10/5
免疫細胞分離技術(shù)1、淋巴細胞的分離取肝素抗凝血1ml加Hanks液1：1稀釋后，沿管壁徐徐滴流疊加盛有2ml淋巴細胞分離液的試管內(nèi)（注意勿與分離液混合，然后2000r/min水平離心20min，管內(nèi)分...
今日快訊：菌種的培養(yǎng)2022/9/26
菌種的培養(yǎng)：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。2、挑選具有某種能...
PCR反應溫度控制設(shè)置2022/9/19
在PCR自動熱循環(huán)中，關(guān)鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示，其變性、退火、延伸的條件是：94℃60s,37℃60s,72℃120s，共25～30個循環(huán)，擴增片段500bp。在這里，每一步的時間...
細菌在培養(yǎng)基上生長特性2022/9/13
細菌在培養(yǎng)基上生長特性:1．固體培養(yǎng)基標本或液體培養(yǎng)物劃線接種到固體培養(yǎng)基表面后，單個細菌經(jīng)分裂繁殖可形成一個肉眼可見的細菌集團，稱為菌落（colony）。①菌落的形態(tài)特征：大小、形狀（露滴狀、圓形、...
新生牛血清的生產(chǎn)工藝2022/9/5
新生牛血清的生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：1、選取淺黃色、澄清且粘稠的原料血清，原料血清采集自出生14小時內(nèi)未進食的新生牛中，上述原料血清pH值為6.8～8.0，蛋白質(zhì)含量為3.5％～5.0％，細菌內(nèi)毒素低...
淺析qPCR反應中的Ct值2022/8/30
閾值循環(huán)數(shù)Thresholdcycle(Ct)也寫作Cq值，熒光信號大于熒光閾值時PCR循環(huán)數(shù)。儀器軟件通常將第3-15個循環(huán)的熒光值設(shè)為基線（baseline），是由于測量的偶然誤差引起的。閾值（t...
ELISA實驗在洗滌過程中注意事項2022/8/22
ELISA在洗滌過程中需注意以下事項：1、板要平整，尤其是在用洗板機洗板的過程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有殘留，從而導致非特異性結(jié)合不能清除干凈，對實驗結(jié)果造成干擾。2、洗液溫...
PCR反應引物的延伸2022/8/15
PCR反應引物的延伸：DNA模板-引物復合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條與模板DNA鏈互補的新鏈。引物延伸溫度的選擇取決于DN...
抗球蛋白試驗原理及應用2022/8/8
抗球蛋白試驗原理及應用：利用抗球蛋白抗體作為第二抗體起橋聯(lián)作用，鏈接與紅細胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，使紅細胞凝集，用于檢測抗紅細胞不*抗體。直接Coombs試驗：新生兒溶血癥，自身免疫性溶血癥，特發(fā)性...
細胞培養(yǎng)的優(yōu)勢特點2022/8/1
細胞培養(yǎng)的優(yōu)勢特點：1.研究的對象是活細胞在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH...
幾種具有不同特異性的二抗總結(jié)2022/7/25
下面總結(jié)了幾種具有不同特異性的二抗：針對整個抗體分子（H＋L）具有特異性：如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結(jié)合也可以與輕鏈結(jié)合，即與抗體分子的Fc，F(xiàn)(ab')2/Fab部分均...
標準的PCR三個基本反應步驟2022/7/18
類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火（復性）--延伸三個基本反應步驟構(gòu)成：1、模板DNA的變性（90℃-95℃）：模板DNA經(jīng)加熱至90~95...
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