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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 CKS1L 基因全長ORF克隆

大鼠 PSME1 基因全長ORF克隆

大鼠 H2AFZ 基因全長ORF克隆

大鼠 BTF3 基因全長ORF克隆

大鼠 AGTRAP 基因全長ORF克隆

大鼠 SARNP 基因全長ORF克隆

大鼠 ANAPC11 基因全長ORF克隆

大鼠 COX4I1 基因全長ORF克隆

大鼠 LOC100911902 基因全長ORF克隆

大鼠 GSTM2 基因全長ORF克隆

CFPAC-1 (胰腺癌細胞) 1.5mL 蛋白K溶液，10mg/mL Proteinase K Solution -20℃保存 1.25-80 ng/mL 鼻病毒(RV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

50T 登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存Andrade氏糖類肉湯進口、國產(chǎn)Andrade’s Carbohydrate Broth用于細菌的糖發(fā)酵試驗250

1g 石榴紅硫酸鹽 Fast Garnet GBC Salt 室溫避光保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human HMG box-containing protein 1

1.5mL 非DNA清除劑 DNA Erasol 4℃保存

50T 鯉春病毒PCR檢測試劑盒   低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人雙特異性蛋白4(DUSP4)ELISA試劑盒

1瓶 B16F10株 B16F10 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1

250mL Anticoagulant CPDA-1 Solution（抗凝劑CPDA-1）  Anticoagulant CPDA-1 Solution  常溫保存 0.312-20 ng/ml 人質半共軛Beta裂合(CCbL1)ELISA試劑盒

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH7.5  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.5  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Prostaglandin E synthase

1瓶 PA319株 PA319 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 1型脊髓灰質炎病毒(PV-1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

季銨鹽類中和劑管  9ml*20 0.312-20 ng/mL 人味覺感受器類型2組分38(T2R38) ELISA試劑盒

1 mg Indo-1，五銨鹽 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 7.8-500 ng/mL 人糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)ELISA試劑盒

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。