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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 CEACAM8 / CD66b 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 EDAR

HULEC-5a (肺微血管內皮細胞) 2 ug pSV2neo pSV2neo 低溫運輸，-20℃保存

2 ug pDEST22 pDEST22 低溫運輸，-20℃保存脫氧膽酸鈉瓊脂進口、國產DCLA250克大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養

1只 硅膠膜離心吸附柱（大提）收集管  進口、國產100克

2 ug pRetro-On pRetro-On 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

1 管 JM109(DE3)大腸桿菌 JM109(DE3) E.coli Strain -80℃保存 15.6-1000 pg/mL 漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

1 g Hemoglobin（NO清除劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人CD34分子(CD34)ELISA試劑盒

100支 1000 μL RNase-free 藍吸頭（盒裝已滅菌）  常溫 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C4b-binding protein beta chain

2 ug pUB6/V5 His lacZ pUB6/V5 His lacZ 低溫運輸，-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人醛脫氫家族16成員A1(ALDH16A1)ELISA試劑盒

100mL CHES Buffer,0.5M,pH9.5   CHES Buffer,0.5M,pH9.5   常溫保存 0.78-50 ng/mL 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒

沙氏瓊脂培養基(SDA) Sabourauds Agar 250g 0.312-20 ng/mL 人鐵鉬輔因子硫化(MCS)ELISA試劑盒

1mL 纖連蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma     -20℃保存SOB肉湯進口、國產SOB Broth250克BR

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。