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NCI-H520 (肺鱗癌細胞)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-05 16:18:10瀏覽次數:99次

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貨號 BJ-X96720
NCI-H520 (肺鱗癌細胞) 公司*的商品:1 mg MM1-43(FM®1-43) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存100mL CAPS Buffer,0.5M,pH9.5 CAPS Buffer,0.5M,pH9.5 常溫保存5次 填入法DNA末端標記試劑盒C Fill-in DNA End Labeling Kit -20℃保存2 ug p

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產品名稱

NCI-H520 (肺鱗癌細胞) 

規格

1×10?cells/T25培養瓶

貨號

BJ-X96720

商品屬性:

名稱    NCI-H520 (肺鱗癌細胞)

別稱H520; H-520; NCI-HUT-520; NCIH520

種屬人類

年齡(性別)不詳

組織來源肺

生長特性貼壁細胞

細胞形態上皮細胞樣

背景描述NCI-H520細胞是由Gazdar AF等在1982年建系而來,源于鱗狀細胞肺癌組織;NCI-H520細胞p53 mRNA表達水平較正常肺組織低,但是沒有大的結構DNA的異常。NCI-H520細胞角蛋白、波形蛋白陽性,神經絲三聯蛋白陰性;NCI-H520細胞在軟瓊脂中可形成克隆。

生物安全等級1

生長培養基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~32-60小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5)).

細胞培養步驟:

.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg 

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

小鼠 LY-96 / ESOP-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

SCG3 / Secretogranin 3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

CGB5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

CPLX3 / Complex

NCI-H520 (肺鱗癌細胞) 1瓶 AE-2株 AE-2 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type II iodothyronine deiodinase

2 ug pCYB 4 pCYB 4 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon omega-1

胰蛋白胨膽鹽瓊脂 Tryptone Bile Agar 250gNLN培養基(含)進口、國產NLN Medium with vitamins10升BR

1瓶 DCS (肉瘤)株 DCS (肉瘤) 低溫運輸和保存

ISP培養基3 ISP Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human C-type lectin domain family 4 member E

1瓶 LLC株 LLC 低溫運輸和保存LIM培養基進口、國產LIM Medium用于鏈球菌的分離培養(Japan方法)250

1瓶 MDCK superdome株 MDCK superdome 低溫運輸和保存 0.78-50 ng/mL 人同源異形盒蛋白OTX2(Homeobox protein OTX2)ELISA試劑盒

氯化鈉瓊脂培養基(2015藥典)  250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Deoxyuridine 5'-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial

5mL 黑色素生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Dual oxidase 2

氣單胞菌鑒別瓊脂 Aeromonas Differential Agar 250g 0.156-10 ng/ml ELISA Kit for Allopregnanolone

四號瓊脂 4 Agar Base 250g

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

 


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