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貨號 | BJ-X96812 |
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操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X96812 |
商品屬性:
名稱 BEAS-2B (正常肺上皮細胞) 別稱Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B 種屬人類 年齡(性別)男性 組織來源肺;支氣管 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述BEAS-2B細胞是從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出的上皮細胞。這些細胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆,BEAS-2B細胞保留了對血清反應(yīng)進行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。BEAS-2B細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO?,5% 溫度:37℃ 致瘤性No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠 TROP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Cystatin E / CST6 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Resistin / ADSF / RETN 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細胞裂解液 (陽性對照
BEAS-2B (正常肺上皮細胞)1mL 衣溶液,5mg/mL Tunicamycin Solution 4℃避光保存木糖發(fā)酵管進口、國產(chǎn)木糖發(fā)酵管20支BR
100次 一步離心式石蠟清除劑 Paraffin Erasol 常溫
50T 豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人胎盤蛋白13(PPL13)ELISA試劑盒
2 ug pKD4 pKD4 低溫運輸,-20℃保存 37.5-2400 pg/mL ELISA Kit for Human Cytosolic non-specific dipeptidase
50T 單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Mesothelin
50T 牛副流感病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pET-40b(+) pET-40b(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人谷脫羧2(GAD2)ELISA試劑盒
BCYE-CYS瓊脂平板(9cm) BCYE-CYS Agar 10個/包 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Interstitial collagenase
5mL 腎系膜生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
500mg 氯化四氮唑蘭 NBT (Nitroblue Tetrazolium Chloride) -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人WAP四硫化物核心域蛋白2(WFDC2)ELISA試劑盒
100次 即用型熒光定量PCR試劑盒 Instant Fluorescent qPCR Kit -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human 5'-nucleotidase
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