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貨號 | BJ-X96810 |
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細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
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產品名稱 | |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
貨號 | BJ-X96810 |
商品屬性:
名稱 Acc-3 (涎腺腺樣囊性癌細胞) 別稱Acc-3; ACC3 年齡(性別)男 組織來源唾液腺腺樣囊性癌 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述Acc-3細胞源自一位49歲男性的腺樣囊性癌;Acc-3細胞能表達角蛋白。(STR檢測位點同HELA) 生長培養基DMEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人 IL17RC 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 STHM / ST6GALNAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CSAGE / CSAG1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 PILRB1 人細胞裂解
Acc-3 (涎腺腺樣囊性癌細胞)5mL AEBSF溶液,10mg/mL AEBSF Solution -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Major histocompatibility complex class I-related gene protein
25OD m7G(5′)ppp(5′)G 帽結構類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存1% NaC1甘露糖發酵管進口、國產1% NaC1甘露糖發酵管20支BR
50T 豬高致病性藍耳病毒RT-PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Transcription factor SOX-2
100mL RNase-free 氯化鋰溶液,10M 常溫D-環絲 進口、國產加入250ml TSC瓊脂基礎中0.1g/支*2
10 mg Simvastatin(HMG-CoA Reductase抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Promotilin
200mL Western印跡膜抗體清除劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存
2 ug pCMV-SPORT6 VAMP2 pCMV-SPORT6 VAMP2 低溫運輸,-20℃保存堿性蛋白胨水進口、國產AP250克增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌
2 ug pMal-p2E pMal-p2E 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人血漿銅藍蛋白(Ceruloplasmin)ELISA試劑盒
42℃生長培養基 42℃growth Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人α黑色素刺激素(α-MSH)ELISA試劑盒
2 ug pGreenPuro (CMV) pGreenPuro (CMV) 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 植物源性成分(RBCL)核酸檢測試劑盒
0.5 g Catechin hydrate(抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
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