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ACT-1 (甲狀腺癌細胞)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-07 13:55:47瀏覽次數:110次

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貨號 BJ-X96956
ACT-1 (甲狀腺癌細胞)公司*的商品:100KU 核糖核酸 T1 Ribonulease T1 4℃保存500mL TBS-Tween-20 (TTBS),10X,in Classical TBS) TBS-Tween-20 (TTBS),10X,in Classical TBS) 常溫保存20次 天凈沙鎳柱原位再生試劑盒 Ni-Agarose Column In-Place Rec

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產品名稱

ACT-1 (甲狀腺癌細胞)

規格

1×10?cells/T25培養瓶

貨號

BJ-X96956

商品屬性:

名稱    ACT-1 (甲狀腺癌細胞)

生長特性貼壁細胞

生長培養基RPMI-164013.6 mg/L hypoxanthine 13.6 mg/L hypoxanthine(0.1 mM)0.176 mg/L aminopterin 0.176 mg/L aminopterin(0.4 μM)3.8 mg/L thymidine 3.8 mg/L thymidine(0.016 mM)20% FBS1% P/S

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

細胞培養步驟:

.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg 

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BMPR-II 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BMPRIA / ALK-3 / CD292 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BMP-5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BMP-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 BACE-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人

ACT-1 (甲狀腺癌細胞)1瓶 HL-7702 [L-02]株 HL-7702 [L-02] 低溫運輸和保存 15.6-1000 pg/mL 人心房肽轉化(CORIN)ELISA試劑盒

CHO培養基基礎 CHO Medium Base 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Deleted in malignant brain tumors 1 protein

2 ug pGL4.10 pGL4.10 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人O6甲基DNA甲基轉移(MGMT)ELISA試劑盒

50T 古典豬瘟病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Metaxin-3

25mL IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10  IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10  常溫保存 1.56-100 ng/mL 人蛋白激Cε(Protein kinase C epsilon type)ELISA試劑盒

2 ug PiggyBac Dual Promoter PiggyBac Dual Promoter 低溫運輸,-20℃保存

5mL Ribonuclease A Solution, 10mg/mL Ribonuclease A Solution, 10mg/mL 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人線粒體[NADP]異檸檬酸脫氫(IDH)ELISA試劑盒

10mL RNase-free 水 RNase-free Water 常溫AB瓊脂進口、國產Alealine Bile Salt Agar250克分離霍亂弧菌

2 ug pETcoco-2 pETcoco-2 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 葉綠醌 ( Phylloquinone)ELISA試劑盒

25g 偏釩酸鈉 Sodium Metavanadate 室溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sclerostin domain-containing protein 1

20次 一站式TA克隆試劑盒 One-Stop AT Cloning Kit -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

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