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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

人 MEP1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 tsukushin 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 PIGR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 FABP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 IL1F1 / IL1α 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 IL36RN / IL1F5 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 IL36RN / IL1F5 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

人

SGC-7901 (胃癌細胞)125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X，pH7.6   RNase-Free TE Buffer,20X，pH7.6   常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Multidrug resistance-associated protein 9

1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存營養(yǎng)瓊脂（NA）  進口、國產(chǎn)Nutrient Agar細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)250

50T 轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人類白組織相容性抗原α鏈G(HLA-G)ELISA試劑盒

500mL Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4   Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4   常溫保存 0.156-10 ng/mL 人骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒

500mL Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  常溫保存 0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9

500U Benzonase核酸 Benzonase Nuclease  -20℃保存Fraser培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Fraser Medium250克李氏菌的增菌培養(yǎng)

2 ug pJRD215 pJRD215 低溫運輸，-20℃保存 78-5000 pg/mL 人散亂蛋白1 human Dishevelled-1ELISA試劑盒

100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution（無RNase的乙酸鈉溶液）,3M，pH5.2  RNase-Free Sodium Acetate Solution,3M，pH5.2  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Tryptophan 5-hydroxylase 2

250mL TE Buffer,pH7.6 TE Buffer,pH7.6 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人Ras相關蛋白(RAB19) ELISA試劑盒

250mL 固相RNase清除劑 Surface RNase Erasol 常溫 0.625-40 ng/mL 人補體7(C7)ELISA試劑盒

20000U S1核酸 S1 Nuclease -20℃保存改良Frey氏培養(yǎng)基基礎進口、國產(chǎn)Frey Medium Modified Base250克培養(yǎng)滑液支原體及其他禽支原體用

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。