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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 Cystatin 7 / CST7 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 WIF1 / WIF-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 人細胞裂解液 (陽性對照) (變

SW837 (結(jié)直腸腺癌上皮細胞)10次 百萬堿基級細菌(G-)DNAout   0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human V(D)J recombination-activating protein 2

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（顆粒）  250g水楊苷發(fā)酵管進口、國產(chǎn)水楊苷發(fā)酵管20支BR

1mg 重組蛋白A Recombinant Protein A -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人垂體腫瘤轉(zhuǎn)化1結(jié)合蛋白(PTTG1IP)ELISA試劑盒

1瓶 CCC-HIE-2株 CCC-HIE-2 低溫運輸和保存 1.56-100 ng/mL 人（Tryptase-1）ELISA試劑盒

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.0   Citrate Buffer,0.5M,pH4.0   常溫保存 78-5000 pg/mL 人/蘇蛋白激mTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR )ELISA試劑盒

1瓶 PRMI 8226 [RPMI-8226]株  PRMI 8226 [RPMI-8226]  低溫運輸和保存細菌蛋白胨進口、國產(chǎn)Peptone Bacteriological 培養(yǎng)基原材料，提供細菌生長所需的生長因子250

25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存 12.5-800 pg/mL 人集聚蛋白(Agrin)ELISA試劑盒

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   常溫保存 0.156-10 ng/mL 人線粒體2酮戊二酸脫氫(OGDH)ELISA試劑盒

100次 植物種屬鑒定PCR Mix 3(質(zhì)體 atpF-H) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

24 T 葡萄糖-6-脫氫測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Desmoglein-2

2 ug pIEXBac-c-EGFP-2 pIEXBac-c-EGFP-2 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/ml ELISA Kit for Human Polyubiquitin-B

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。