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Reh (急性非B非T淋巴細胞白血病)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-07 09:56:06瀏覽次數(shù):121次

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貨號 BJ-X96800
Reh (急性非B非T淋巴細胞白血病) 公司*的商品:1 管 GS190酵母菌 Pichia pastoris Strain GS115 -80℃保存2 ug pShuttle-CMV pShuttle-CMV 低溫運輸,-20℃保存50次 柱式細菌RNAout Column Bacterial RNAOUT 4℃保存2 ug pCMV5-Flag pCMV5-Flag 低溫運輸,-20℃保

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

Reh (急性非B非T淋巴細胞白血病) 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

BJ-X96800

商品屬性:

名稱    Reh (急性非BT淋巴細胞白血病)

別稱REH

種屬人類

年齡(性別)15

組織來源外周血

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài)淋巴母細胞樣

背景描述CD3A(17%)CD3B(17%)CD3C(20%)CD4(15%)CD10(55%)

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~50-70小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

細胞培養(yǎng)步驟:

.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠 Tie2 / TEK 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 B2M / Beta-2-microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

Reh (急性非B非T淋巴細胞白血病) 2 ug pET-23a(+) pET-23a(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 

100ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 90ml/袋*10

2 ug pGEX-3X pGEX-3X 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒

50次 一步式細菌DNAout One-Step Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存) 0.156-10 ng/mL 人巖藻糖苷αL1(FUCα1)ELISA試劑盒

4mg 神經(jīng) ( 梭菌 ) Neuraminidase 4℃保存

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Bile Broth 250g 0.312-20 ng/mL 人血紅素結(jié)合蛋白(HPX)ELISA試劑盒

2 ug PT2/RMCE-puDTK PT2/RMCE-puDTK 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人細絲蛋白B (Filamin-B) ELISA試劑盒

100µg 人玻連蛋白 Vitronectin -20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Estrogen-related receptor gamma

100mg 尿苷 -5'- 二 (UDP)Uridine 5′-Diphosphate -20℃保存

50T 間日瘧PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

MRS培養(yǎng)基 MRS Medium 250g 31.2-2000 pg/mL 人線粒體琥珀酸鹽半醛脫氫(SSADH)ELISA試劑盒

 


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