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PED (豬內皮細胞)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-07 09:46:44瀏覽次數:139次

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貨號 BJ-X96798
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產品名稱

PED (豬內皮細胞)

規格

1×10?cells/T25培養瓶

貨號

BJ-X96798

商品屬性:

名稱    PED (豬內皮細胞)

種屬豬

年齡(性別)不詳

組織來源未知

生長特性貼壁細胞

細胞形態上皮細胞樣

生長培養基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

細胞培養步驟:

.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg 

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

小鼠 Nicastrin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ASGR2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BPI 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 ApoA1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 tPA / PLAT 人細胞裂解液 (陽性對

PED (豬內皮細胞)250mL Regular Washing Solution,5X Regular Washing Solution,5X 常溫保存高鹽察氏培養基進口、國產Salt Czapek Dox Agar250克用于霉菌和酵母菌的計數

5mL 內毒素清除專用親和介質 Endotoxin Removal Resin 4℃保存

支原體培養基基礎(含) Mycoplasma Broth Base 250g 0.156-10 ng/mL 人Ⅹ(F10)ELISA試劑盒

1瓶 HuH-7株 HuH-7 低溫運輸和保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proenkephalin-B

2 ug pET-41 Ek/LIC pET-41 Ek/LIC 低溫運輸,-20℃保存

1瓶 S-180株 S-180 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

營養肉湯 Lysozyme Nutrient Broth 250g 0.94-60 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix extracellular phosphoglycoprotein

50T 人博卡病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存 0.625-40 ng/ml ELISA Kit for Human Pro-epidermal growth factor

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.4  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.4  常溫保存麥芽糖發酵管進口、國產麥芽糖發酵管20支BR

2 ug pGAD53m pGAD53m 低溫運輸,-20℃保存游離測定培養基進口、國產Free Biotin Assay Medium用于嬰兒食品和乳粉中游離測定250

1mL 長效期SDS-PAGE上樣液 Stable SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存 1.57-100 ng/mL 人無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

 


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