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貨號 | BJ-X96946 |
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產品名稱 | |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
貨號 | BJ-X96946 |
商品屬性:
名稱 LS513 (結直腸癌細胞) 別稱LS-513; LS 513 種屬人類 年齡(性別)男性,63歲 組織來源盲腸 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述LS513 is a colorectal carcinoma cell line isolated in 1985 from a primary tumor biopsy from a 63 year old Caucasian male patient diagnosed with a Dukes' C mucin secreting cecal tumor located at the Bauhin valve. 生物安全等級1 生長培養基RPMI-1640+10% FBS+1%P/S 推薦傳代比例1:3-1:5 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~20小時 (PubMed=25984343) 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, forms tumors in nude mice 抗原表達情況carcinoembryonic antigen (CEA); ICAM-1; HLA class I positive 基因表達情況transforming growth factor beta 1 |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 EpCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對
LS513 (結直腸癌細胞) 0.1mL 微量RNA助沉劑 RNADOWN -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
YEP培養基 YEP Medium 250gBaird-Parker瓊脂基礎 進口、國產Baird-Parker Agar Base用于菌的選擇性分離培養(GB、SN標準)250
100mL 吐溫 -80 Tween-80 室溫密封保存 0.156-10 ng/mL 人粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒
250mL MES Buffer,0.2M,pH5.5 MES Buffer,0.2M,pH5.5 常溫保存
50次 軟骨RNAout Cartilage RNAOUT 4℃保存 0.312-20ng/mL ELISA Kit for Human Aldose reductase
100次 糞便DNAout Stool DNAOUT 常溫 0.156-10 ng/mL 人母體胚胎拉鏈激(MELK)ELISA試劑盒
乳酸桿菌選擇性培養基 LBS Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Meteorin
其它培養基 0.78-50 ng/mL 人吞蛋白A2(Endophilin-A2)ELISA試劑盒
1瓶 BGC-803株 BGC-803 低溫運輸和保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Folate receptor beta
2 ug pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人肌生成素(Myogenin)ELISA試劑盒
胰胨大豆瓊脂斜面(TSA) Tryptic Soy Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human T-lymphocyte activation antigen CD86
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
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