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LS513 (結(jié)直腸癌細胞)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-07 13:57:56瀏覽次數(shù):116次

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貨號 BJ-X96946
LS513 (結(jié)直腸癌細胞) 公司*的商品:1瓶 NCI-H1688細胞株 NCI-H1688 低溫運輸和保存營養(yǎng)瓊脂(瓊脂20g) Nutrient Agar(Agar 20g) 250g10g D- 阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 室溫干燥保存250mL Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.4 Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.4 常溫

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

LS513 (結(jié)直腸癌細胞) 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

BJ-X96946

商品屬性:

名稱    LS513 (結(jié)直腸癌細胞)

別稱LS-513; LS 513

種屬人類

年齡(性別)男性,63

組織來源盲腸

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述LS513 is a colorectal carcinoma cell line isolated in 1985 from a primary tumor biopsy from a 63 year old Caucasian male patient diagnosed with a Dukes' C mucin secreting cecal tumor located at the Bauhin valve.

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1%P/S

推薦傳代比例1:3-1:5

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~20小時 (PubMed=25984343)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, forms tumors in nude mice

抗原表達情況carcinoembryonic antigen (CEA); ICAM-1; HLA class I positive

基因表達情況transforming growth factor beta 1

細胞培養(yǎng)步驟:

.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

EpCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對

LS513 (結(jié)直腸癌細胞) 0.1mL 微量RNA助沉劑 RNADOWN -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

YEP培養(yǎng)基 YEP Medium 250gBaird-Parker瓊脂基礎(chǔ)    進口、國產(chǎn)Baird-Parker Agar Base用于菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))250

100mL 吐溫 -80 Tween-80 室溫密封保存 0.156-10 ng/mL 人粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒

250mL MES Buffer,0.2M,pH5.5   MES Buffer,0.2M,pH5.5   常溫保存

50次 軟骨RNAout Cartilage RNAOUT 4℃保存 0.312-20ng/mL ELISA Kit for Human Aldose reductase

100次 糞便DNAout Stool DNAOUT 常溫 0.156-10 ng/mL 人母體胚胎拉鏈激(MELK)ELISA試劑盒

乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基 LBS Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Meteorin

其它培養(yǎng)基   0.78-50 ng/mL 人吞蛋白A2(Endophilin-A2)ELISA試劑盒

1瓶 BGC-803株 BGC-803 低溫運輸和保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Folate receptor beta

2 ug pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人肌生成素(Myogenin)ELISA試劑盒

胰胨大豆瓊脂斜面(TSA) Tryptic Soy Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human T-lymphocyte activation antigen CD86

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

 


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