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KYSE-150 (食管鱗癌細(xì)胞)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-07 13:55:30瀏覽次數(shù):117次

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貨號(hào) BJ-X96944
KYSE-150 (食管鱗癌細(xì)胞) 公司*的商品:20000U S1核酸 S1 Nuclease -20℃保存2 ug pED-GST-pp-air pED-GST-pp-air 低溫運(yùn)輸,-20℃保存改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基管 5ml*20支10g 3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 TAPS 密封干燥保存50T 玉米MS PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

KYSE-150 (食管鱗癌細(xì)胞) 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

BJ-X96944

商品屬性:

名稱    KYSE-150 (食管鱗癌細(xì)胞)

別稱KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150

種屬人類

年齡(性別)女性,49

組織來源食管

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述Established from the poorly differentiated esophageal squamous cell carcinoma resected from upper (cervical) esophagus of a 49-year-old Japanese woman after receiving radiotherapy (tumor was invading contiguous structures); described as carrying amplified oncogenes, c-erb-B (8x) and cyclin D1 (4x) and producing tumors in nude mice.

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640Ham's F-1210% FBS1%P/S

推薦傳代比例1:4-1:8

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~13.7小時(shí) (PubMed=1728357); 23小時(shí) (PubMed=25984343);

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Frizzled-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

FGF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

小鼠 Fetuin-A / AH

KYSE-150 (食管鱗癌細(xì)胞) 1 管 WB600枯草桿菌 WB600 Bacillus subtilis Strain -80℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Calpain-2 catalytic subunit

100次 亞硫酸鹽修飾的DNA  

150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR Sephacryl S-500 HR 室溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I

500mL Separating or Resolving Buffer(分離膠緩沖液) Separating or Resolving Buffer 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Lipid phosphate phosphatase-related protein type 4

50T 人Her2/neu基因PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pyrin

1 g Sodium Butyrate (HDAC抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Discoidin domain-containing receptor 2

接種測試微生物瓊脂培養(yǎng)基 Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism) 250g 0.312-20 ng/mL 轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

1mL 預(yù)稀釋 BGG 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品 Instant BGG Standard -20℃保存 6.25-400 U/mL ELISA Kit for Human Non-secretory ribonuclease

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH9.5   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH9.5   常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Fibrillin-3

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH5.0  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH5.0  常溫保存

1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 1%Tween80-Corn Meat Agar Mediun 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Cholesterol 7-alpha-monooxygenase

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

 


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