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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

小鼠 TLR3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

小鼠 VEGF-A 轉錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 VEGF-A 轉錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

小鼠 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆 (表

QGY-7701 (肝癌細胞)2 ug pBNID-Id pBNID-Id 低溫運輸，-20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人巖藻糖基轉移6(FUT6)ELISA試劑盒

2mg 辣根過氧化物標記親和素 HRP-Avidin -20℃保存 7.8-500 U/mL ELISA Kit for Human Interleukin-2 receptor subunit beta

5mL 成纖維生長因子-2 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin enhancer-binding factor 3

D-環溶液  5ml*10WL營養瓊脂進口、國產WL Nutrient Agar用于啤酒和發酵產品中酵母菌和細菌的計數250

3%NaCl脫羧  20支

125mL RIPA Buffer with Glycerol,2X  RIPA Buffer with Glycerol,2X  常溫保存霉菌培養基進口、國產Mould Medium用于生物制品霉菌無菌試驗（GB標準）250

150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-400 HR Sephacryl S-400 HR 室溫保存膽鹽硫乳瓊脂培養基進口、國產DHL Agar250克沙門氏菌和志賀氏菌的分離培養

2 ug pSilencer 4.1-CMV neo pSilencer 4.1-CMV neo 低溫運輸，-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Cholinesterase

15mL 非凍型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER 室溫 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Myc proto-oncogene protein

5次 大提柱式血液RNAout Maxi Column Blood RNAOUT 4℃保存 0.625-40 ng/mL 人B淋巴白血病/淋巴瘤11B ELISA試劑盒

50T 嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。