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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

小鼠 Smad1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

小鼠 MAPK14 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 Smad5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

小鼠 CD54 / ICAM1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 VEGF-C 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

小鼠 ALK-2 / ACVR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

人 GLP1R 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 Spp1 轉錄變體1

UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞)50T 乳酸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Kin of IRRE-like protein 1

1個 冰袋   1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Cytochrome P450 1A1

50T 梅迪一維斯納病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 6.25-400 pg/mL ELISA Kit for Human Protein unc-13 homolog C

MI瓊脂培養基平板  9cm*10個 0.156-10 ng/mL 人內皮特異性分子1（ESM-1）ELISA試劑盒

1mg 重組蛋白G Recombinant Protein G -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人線粒體CDP-甘油二酯-甘油-3-3磷酯酰轉移(PGP synthase 1)ELISA試劑盒

1mL 博萊溶液,10mg/mL Bleomycin Solution -20℃避光保存假單胞P瓊脂進口、國產Pseudomonas Agar P250克銅綠（綠膿）假單胞菌色素生成試驗

250U 無機焦，熱穩定 Inorganic Pyrophosphatase，Thermostable -20℃保存

1瓶 293E株 293E 低溫運輸和保存酪胨進口、國產Casitone250克BR

100μL Camptothecin（ ） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Aquaporin-1

20次 一站式His標記蛋白質微量純化套裝(超聲破碎) One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介質請于20%乙醇中4℃保存，PMSF于-20℃保存，其余試劑4℃放置

50T 人亞甲基四氫還原基因C677T突變PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人抗原KI-67(Antigen KI-67)ELISA試劑盒

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。