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P19 (P-19) (小鼠畸胎瘤細(xì)胞)

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產(chǎn)品型號

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更新時間:2022-04-26 15:44:23瀏覽次數(shù):99次

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貨號 BJ-X96498
P19 (P-19) (小鼠畸胎瘤細(xì)胞)公司*的商品:50T 弓形蟲PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存1g 魯米諾 Luminol 4℃保存2 ug TOPFlash TOPFlash 低溫運輸,-20℃保存10g 酸洗玻璃珠(直徑:100μm) 常溫2 ug pAcAd5 CMV-GFP pAcAd5 CMV-GFP 低溫運輸,-20℃保存

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

產(chǎn)品名稱

P19 (P-19) (小鼠畸胎瘤細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

BJ-X96498

商品屬性:

名稱    P19 (P-19) (小鼠畸胎瘤細(xì)胞)

別稱P-19

種屬小鼠

年齡(性別)雄性

組織來源胚胎;畸胎癌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述P19細(xì)胞是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的畸胎癌中建立的;P19細(xì)胞在含有0.1mMβ-巰基乙醇的培養(yǎng)基中克隆的效率高。細(xì)胞具有多能性:在500nMA酸誘導(dǎo)下,細(xì)胞可以分化成神經(jīng)樣和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在0.5%-1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,細(xì)胞分化形成心臟和骨骼肌樣基質(zhì),但不形成神經(jīng)樣或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞。在DMSOA酸同時存在時,細(xì)胞的分化與只有A酸一樣。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEMα7.5% CS2.5% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~48-72小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

 

圖片13.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

甲型流感 H7N7 (equine/Kentucky/1a/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

甲型流感 H7N2 (ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

甲型流感 H7N1 (turkey/Italy/4602/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長O

P19 (P-19) (小鼠畸胎瘤細(xì)胞)100 mg MEQ,(6-甲氧-N-乙基) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 0.78-50 ng/mL 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒

2 ug pGL3- enhancer pGL3- enhancer 低溫運輸,-20℃保存 1.56-100 ng/ml 人組織蛋白C(CTS-C)ELISA試劑盒

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.5  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.5  常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ubiquitin-associated protein 2

尿素  20支 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Growth/differentiation factor 2

2 ug pBAD18 pBAD18 低溫運輸,-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Multidrug resistance-associated protein 6

100g 聚乙烯吡咯烷酮 K360 Polyvinylpyrrolidone(PVP K360) 室溫保存 0.312-20 ng/mL 人鈣調(diào)素(RC)ELISA試劑盒

1.5mL DNA尿素-PAGE上樣液 DNA Urea-PAGE Loading Buffer -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-6

25uL Cy5-dCTP溶液 (10 mM) Cy5-dCTP Solution -20℃保存

10mL 氨芐溶液,50mg/mL Ampicillin Solution -20℃保存 312-20000 pg/mL ELISA Kit for Human Pikachurin

2 ug pLVX-mCherry-N1 pLVX-mCherry-N1 低溫運輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protransforming growth factor alpha

七葉苷培養(yǎng)基 Esculin Medium 10 15.6-1000 pg/mL 人輔Q結(jié)合蛋白COQ10同系物B(CQ10B)ELISA試劑盒


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