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貨號	BJ-X97014

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產品名稱	大鼠氣管上皮細胞
規格	5×10?Cells/T25培養瓶
貨號	BJ-X97014

商品屬性：

名稱 大鼠氣管上皮細胞

2.組織來源：氣管

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環，缺口向后，各軟骨環以韌帶連接起來，環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠氣管上皮細胞采用-混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠氣管上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R004

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

重組人 FGF10 蛋白

重組人 FGF9 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 aFGF / FGF1 蛋白

重組人 bFGF / FGF2 蛋白

重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽)

重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標簽)

重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標簽)

大鼠氣管上皮細胞Schistosoma curassoni柯拉松血吸蟲LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周CABLES2 細胞周期蛋白依賴性激CABLES2抗體規格: 0.2mlGentamicin 抗體規格: 0.2ml

Plasmodium gallinaceum雞瘧原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Rabbit Anti-Bov IgG/PE PE標記的兔抗牛IgG 規格: 0.1mlPhospho-PLC gamma 1(Ser1248) 磷酸化磷酯Cγ1抗體規格: 0.1ml

Radix ginseng rubra紅參探針法PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Integrin beta 6 整合素β6抗體（Integrin β6） 0.2mlAdenylate Kinase 1/AK1 苷酸激-1抗體規格: 0.2ml

Candida albicans白色念珠LAMP試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周LAMP-3/DC-LAMP/CD208 溶體相關膜蛋白3抗體規格: 0.1mlPhospho-HER3(Tyr1328) 磷酸化HER3受體抗體規格: 0.1ml

Hart Park Virus哈特帕克病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周Exendin 4 GLP1類似蛋白Exendin4抗體規格: 0.1mlphospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白抗體規格: 0.1ml

Rhizoma cimicifugae升麻LAMP鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Goat Anti-Bovine IgG/Cy7 Cy7標記的羊抗牛IgG 規格: 0.1mlCR1/CD35 Ⅰ型補體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）規格: 0.1ml

兔源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體規格: 0.2mlC5 瘤易性候選基因5抗體規格: 0.2ml

Myxosporidia spp.黏孢子蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周GABRA1 G1氨基丁酸A型受體α1抗體規格: 0.1mlTIMP-2 金屬蛋白組織抑制因子-2抗體規格: 0.1ml

Melon Necrotic Spot Virus(MNSV)西瓜壞死斑病毒RT-PCR試劑盒植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-3周phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體規格: 0.1mlDC-SIGN/CD209 細胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體規格: 0.1ml

Ophiocordyceps Sinensis冬蟲夏草PCR鑒定試劑盒中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次低溫負20度一年 2-4周Rabbit Anti-rat IgM/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗大鼠IgM 規格: 0.1mlPLGLB2 纖溶相關蛋白B2抗體規格: 0.2ml

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。