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PCR反應條件溫度與時間選擇技巧2024/12/9
PCR反應條件的選擇技巧主要體現在溫度、時間和循環次數上，溫度過高，延伸時間不夠都會對實驗結果有很大的影響。PCR反應條件三要素為溫度、時間和循環次數。溫度與時間的設置基于PCR原理三步驟而設置變性-...
細胞老化的征兆2024/12/2
細胞老化的征兆1、細胞周期阻滯：長期的細胞周期阻滯是老化細胞的基本特征，也是體外鑒定細胞老化的指標。為了檢查細胞是否躍出了細胞周期，人們通常檢測增殖指示分子Ki-67的表達豐度；或者通過將與胸腺嘧啶相...
科研實驗對抗體需求指導2024/11/26
科研實驗工作離不開抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那么這幾種實驗技術都需要什么樣的抗體呢？1.WBWB的蛋白經過加熱變性之后都變成線性的結構。因此*好的抗體是采用非常特異...
ELISA試驗洗滌參數與次數介紹2024/11/18
ELISA即酶聯免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標記（偶聯）的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標儀測定待測物顏色與標準物顏色的...
干血斑DNA快速提取試劑盒實驗反應條件優化2024/11/4
干血斑DNA快速提取試劑盒實驗反應條件優化：1、變性溫度和時間：保證模板DNA解鏈是保證整個PCR擴增成功的關鍵。加熱90~95°C,30~60s，再復雜的DNA分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續...
ELISA試劑盒樣本實驗前準備2024/10/28
樣本實驗前準備：ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。（1）血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。...
細胞冷凍保存方法?步驟與注意事項2024/10/21
冷凍保存方法：1、傳統方法:冷存管置于4℃10分鐘----20℃30分鐘----80℃16～18小時(或隔夜)---液氮槽vaporphase長期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止胞內冰晶過大，造成...
ELISA酶聯免疫吸附實驗常見類型特點2024/10/14
ELISA實驗就是酶聯免疫吸附實驗（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）是將抗原或抗體結合在固相載體表面，利用抗原抗體的特異性結合以及抗體或者抗原上標記的酶催化特...
細胞的凍存和復蘇過程2024/10/9
細胞的凍存和復蘇原理：在不加條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑，...
?ELISA檢測試劑盒比色解析2024/9/29
ELISA的比色測定由酶標儀進行，有的同行可能會認為，既然由酶標儀進行，那么此時便可以萬事大吉了，其實不然，因為當代較為先進的酶標儀器儀表，均有較多的功能，使用不當，會得到令人難以理解的結果。如使用酶...
PCR反應被抑制或效率較低調整過程2024/9/24
PCR反應被抑制或效率較低調整過程:一旦確定反應被抑制或效率較低，則可采取一些步驟將效率值重新調整到理想范圍內。1、對于抑制作用，可去除模板濃度最高的反應孔并重新分析標準曲線。如果效率重新回到110%...
細胞培養實驗基本操作2024/9/18
細胞培養實驗基本操作：1、進無菌室前要洗手，按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。2、操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意...
PCR反應總RNA提取操作流程2024/9/9
PCR反應總RNA提取操作流程：1、A組織樣本：迅速將新鮮的組織切成合適的大小，在液氮中充分研磨后加裂解液裂解，或直接加入裂解液后用勻漿器勻漿。每30-50mg組織加1mlTrizol。2、B全血樣品...
合適細胞株常見鑒定方法2024/9/2
當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是適用的，則一定要通過各種鑒定。分析常見的方法有：1、Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴散法進行測定，確定其Ig類型或Ig...
鑒定適合細胞株的常見方法2024/8/26
鑒定適合細胞株的常見方法：當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是適用的，則一定要通過各種鑒定。分析常見的方法有：1、Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴散法進行...
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