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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
人血管內皮細胞直銷 | T25m2 | CS-963729 |
人血管內皮細胞【Human Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesA,Gzms-A 96T/48T 葡聚糖D20/右旋糖苷 Dextran D20 質量規格:MW:16000~24000
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit 沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽 Saxagliptin HCL 質量規格:>98%,BR
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesB,Gzms-B 96T/48T 表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG95%) EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract 質量規格:茶多酚≥98%,EGCG≥95%,≤0.1%
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 達沙替尼一水合物 Dasatinib Monohydrate 質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養
大鼠可溶性CD14(sCD14)試劑盒 Rat soluble cluster of differeiation 14,sCD14 ELISA Kit 依西美坦 Exemestane (USP) 質量規格:>99%,USP,Aromatase inhibitor
大鼠可溶性CD23(sCD23)試劑盒 Rat soluble CD23,sCD23 ELISA Kit 依西美坦(標準品) Exemestane 質量規格:>99%,標準品
大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit Amidopyrine/aminopyrine 質量規格:>98%,AR
大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit 血管緊張素II Angiotensin II 質量規格:>98.0%,BR
大鼠可溶性CD80(sCD80)試劑盒 Rat Soluble Cluster of Differeiation 80,sCD80 ELISA Kit 維生素 D3 ((膽骨化醇) Vitamin D3 質量規格:>98.0%(HPLC)4000萬IU/g
大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒 Rat soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit 帕唑帕尼鹽酸鹽 Pazopanib HCl 質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養
RatEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit大鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 貝萼皂苷元甲酯 HPLC≥95% 20mg
5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20 氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒 ,英文名: VC ELISA Kit 佛波醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA檢測試劑盒MouseE-SelectinELISAkit 96T/48T 三七皂苷T HPLC≥95% 20mg
人過氧化氫酶(CAT)試劑盒 Human Catalase,CAT ELISA kit 帕克醇 HPLC≥95% 20mg
ratEndothelin1,ET-1ELISAKit大鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標記試劑盒20 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
MousefactorB,BFELISA試劑盒小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去氧蘇木查耳酮 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素B9(VB9)ELISA試劑盒 ,英文名: VB9 ELISA Kit 過氧去氫土莫酸 HPLC≥95% 20mg
人血管內皮細胞直銷RatIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山苦草素A HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISAKit大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山橘脂酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山椒子烯酮 HPLC≥98% 10mg
RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山椒子烯醇 HPLC≥98% 10mg
RatIerleukin10,IL-10ELISA試劑盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山姜素(標準品) Alpinetin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山姜素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山姜素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山梗菜堿 HPLC≥97% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山柑子堿 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒規格:96T/48T 山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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