當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2人臍動脈內皮細胞操作
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產品名稱 | 人臍動脈內皮細胞操作 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963732 |
人臍動脈內皮細胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
血液乙脫氫酶3活性比色法定量檢測試劑盒20 3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-γ-環(huán)糊精水合物(>95.0%(HPLC)) 3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate 質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒DuckIerferonγ,IFN-γ 96T/48T 6-O-α-D-麥芽糖基-β-環(huán)糊精(>98.0%(HPLC)) 6-O-α-D-Maltosyl-β-cyclodextrin 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
鴨白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin1,IL-1 96T/48T 基-β-環(huán)糊精(>98.0%(HPLC)) Trimethyl-β-cyclodextrin 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2 96T/48T 三乙酰基-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC)) Triacetyl-β-cyclodextrin 質量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
鴨白介素4(IL-4)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin-4,IL-4 96T/48T 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC)) 10,12-Heptacosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>98.0%(GC)
鴨白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin6,IL-6 96T/48T 2,4-十七二炔酸(>95.0%(T)) 2,4-Heptadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>95.0%(T)
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin-8,IL-8 96T/48T 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T)) 2,4-Heneicosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>95.0%(T)
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA檢測試劑盒Duckviruseeritis,DEV 96T/48T 10,12-十七二炔酸(>97.0%(T)) 10,12-Heptadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)
鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHC 96T/48T 10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T)) 10,12-Nonacosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)
乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRab 96T/48T 2,4-十九二炔酸(>97.0%(T)) 2,4-Nonadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)
Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'E癸二烯酰基)O乙酰巨大戟二萜醇 HPLC≥95% 20mg
50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升 O('E,'Z癸二烯酰基)巨大戟二萜醇 HPLC≥95% 20mg
Mouseferritin,FEELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'E癸二烯酰基)巨大戟二萜醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 巖大戟內酯A HPLC≥95% 20mg
Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 巖大戟內酯E HPLC≥95% 20mg
HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 大戟因子L HPLC≥95% 20mg
ChickenLeinizingHormone,LHELISA試劑盒雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大戟因子La HPLC≥95% 20mg
載玻片細胞NFKAPPABP50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 大戟因子L HPLC≥95% 20mg
MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大戟因子L HPLC≥95% 20mg
小鼠維X受體α(RXRα)ELISA試劑盒 ,英文名: RXRα ELISA Kit 異山柰素 HPLC≥95% 20mg
人臍動脈內皮細胞操作RatIerleukin21,IL-21ELISAKit大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%) Aramite solution 質量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
RatIerleukin21,IL-21ELISA試劑盒大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺螟丹(標準品) Aramite 質量規(guī)格:分析標準品,99%
RatIerleukin23,IL-23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺蟲脲(標準品) Triflumuron 質量規(guī)格:分析標準品
RatIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺蟲單(標準品) Thiosultap di 質量規(guī)格:分析標準品
RatIerleukin27,IL-27ELISAKit大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色瑞替尼,LDK378 Ceritinib;LDK-378 質量規(guī)格:>98%,ALK抑制劑
RatIerleukin27,IL-27ELISA試劑盒大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色甘酸鈉(標準品) Cromolyn 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色甘酸鈉 Cromolyn 質量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)
RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色酚AS醋酸鹽(>98%,BC) Naphthol AS acetate 質量規(guī)格:>98%,BC
RatIerleukin3,IL-3ELISAKit大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色胺(>98%,BR) Tryptamine 質量規(guī)格:>98%,BR
RatIerleukin3,IL-3ELISA試劑盒大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色胺 HPLC≥98% 20mg
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。