當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2人臍動脈平滑肌細胞說明
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
人臍動脈平滑肌細胞說明 | T25m2 | CS-963735 |
人臍動脈平滑肌細胞【Human Umbilical Cord:Normal Umbilical Cord Aortic Smooth Muscle Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit 玉米黃質 Zeaxanthin 質量規格:>40%
大鼠胰蛋白酶原-1 試劑盒 Rat ypsinogen 1 ELISA Kit 三亞乙基硫代磷酰胺 Triethylenethiophosphoramide 質量規格:>98%,BR
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA檢測試劑盒Ratypsinogenactivationpeptide,TAP 96T/48T 普拉克索堿 Pramipexole Base 質量規格:>98.5%
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒 Rat ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit 普拉克索堿(標準品) Pramipexole Base 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠胰蛋白酶原酶(y)試劑盒 Rat ypsinogen,y ELISA Kit 染料木素/金雀異黃酮 Genistein 質量規格:≥98%,BR
大鼠胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒RatInsulin,INS 96T/48T 染料木素/金雀異黃酮(標準品) Genistein 質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠胰島素(INS)試劑盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit 木犀草素 Luteolin 質量規格:HPLC≥97%,BR
大鼠胰島素降解酶(IDE)試劑盒 Rat Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit 木犀草素(標準品) Luteolin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒RatInsulieceptorβ,ISR-β 96T/48T 熊果酸 Ursolic acid 質量規格:HPLC≥85%,BR
大鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 熊果酸;烏蘇酸(標準品) Ursolic acid 質量規格:HPLC≥98%,標準品
英文名稱HumancalcitoningenerelatedpeptideELISAKit人降鈣素基因相關肽(CGRP)規格:96T/48T 桑辛素 D HPLC≥95% 20mg
調料乙醇比色法定量檢測試劑盒20 異粉防己堿N'氧化物 HPLC≥95% 20mg
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISA試劑盒大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 鬃毛酮 HPLC≥95% 20mg
小鼠微精蛋白β(MSMβ)ELISA試劑盒 ,英文名: MSMβ ELISA Kit 香茶菜乙素 HPLC≥95% 20mg
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T 伊博格堿 HPLC≥95% 20mg
牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit 乙酸雷公藤內酯A HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanCTELISAKit人降鈣素(CT)規格:96T/48T 柘樹咕噸酮B HPLC≥95% 20mg
調料乙酸比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸SZ HPLC≥95% 20mg
Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISA試劑盒大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 銀線草內酯醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)ELISA試劑盒 ,英文名: MAP1LC3B ELISA Kit 粘毛黃芩素I HPLC≥95% 20mg
人臍動脈平滑肌細胞說明RatImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T (分析標準品,>97%(HPLC)) 質量規格:分析標準品,>97%(HPLC)
RatImmunoglobulinE,IgEELISAKit大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三基十四烷基氯化膦 Tributyltetradecylphosphonium chloride 質量規格:50%grade
RatImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三乙酰基-β-環糊精(>97.0%(HPLC)) Triacetyl-β-cyclodextrin 質量規格:>97.0%(HPLC)
RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三乙酸柚皮素酯 HPLC≥98% 5mg
RatImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T)) Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid 質量規格:>98.0%(T)
RatImmunoglobulinM,IgMELISAKit大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三乙二醇二醚(添加穩定劑BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 質量規格:>98.0%(GC)
RatImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三葉豆紫檀苷(標準品) Trifolirhizin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三葉豆紫檀苷 HPLC≥98% 20mg
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISA試劑盒大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三葉豆苷 HPLC≥98% 20mg
RatInhibin,INH-AELISAKit大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三氧化鎢(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 質量規格:>99%,BC
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。