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上海莼試生物技術有限公司
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人膀胱成纖維細胞操作

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-19 19:29:44瀏覽次數(shù):110次

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人膀胱成纖維細胞操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人膀胱成纖維細胞【Human BladderNormal Bladder Fibroblasts產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產(chǎn)品名稱

人膀胱成纖維細胞操作

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963740

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。
 大鼠孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 Rat Progesterone,PROG ELISA kit 瓊脂粉  Agar  質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade

大鼠孕酮受體(PROGR)試劑盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 三氟胸苷;三氟尿苷(TFT)   Trifluridine; Trifluorothymidine  質(zhì)量規(guī)格:>98%

大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 Rat apolipoprotein A1,Apo-A1 ELISA Kit 四水合輔羧酶;四水合硫胺焦酯  Cocarboxylase tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)試劑盒 Rat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit 甲磺酸加替沙星  Gatifloxacin mesylate  質(zhì)量規(guī)格:BR,加替沙星干品含量>78%

大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)試劑盒 Rat Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit 鹽酸哌羅匹隆  Perospirone   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 Rat apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit 替拉扎明  Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)  質(zhì)量規(guī)格:>98%

大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)試劑盒 Rat apolipoprotein B-48,ApoB48 ELISA kit 糊精;白糊精  Dextrin  質(zhì)量規(guī)格:BR

大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)試劑盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit 鹽酸芐達明  Benzidamine HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit 葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)  Sephadex G-50  質(zhì)量規(guī)格:分類范圍3×100000

大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測試劑盒RatApolipoproteinE,Apo-E 96T/48T 葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)  Sephadex G-50  質(zhì)量規(guī)格:分類范圍3×100000
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醉魚草皂甙IV HPLC98% 20mg

小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒 ,英文名: omein ELISA Kit 鹽酸普羅托平; 鹽酸藍堇堿 HPLC98% 20mg

小鼠趨化因子(FK)ELISA檢測試劑盒MouseFractalkine,FKELISAKit 96T/48T 脫水羊藿素 HPLC98% 20mg

人胱抑素SN(CST1)試劑盒 Human Cystatin-SN,CST1 ELISA kit 去氫丹參新酮 HPLC98% 20mg

RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 偽石蒜堿 HPLC98% 20mg

5-HIAA高效液相色譜電化學定量檢測試劑盒20 β常春藤素 HPLC98% 20mg

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA試劑盒小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯甲酰新烏頭原堿鹽酸鹽 HPLC98% 20mg

小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 毛萼晶A HPLC95% 20mg

Rat caspase 3 (Casp-3) ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 脫氫樅醇 HPLC95% 20mg

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinepsilon,C/EBPεELISAKit CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 異牡荊黃素 HPLC98% 20mg
人膀胱成纖維細胞操作RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三尖杉寧堿(標準品)  Cephalomannine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

Ratleoopichormone,LHELISAKit大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三尖杉寧堿 HPLC98% 20mg

Ratleoopichormone,LHELISA試劑盒大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三尖杉堿(標準品)  Cephalotaxlen  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三尖杉堿 HPLC98% 20mg

RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 基乙酸(>99%,BR)  Trimethylacetic acid  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T -β-環(huán)糊精(>98.0%(HPLC))  Trimethyl-β-cyclodextrin  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

RatLeptin,LEPELISA試劑盒大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T [3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T))  Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)

RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三環(huán)唑標準溶液(10μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%

RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三環(huán)唑標準溶液(100μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%

RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))  Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

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