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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
人前列腺上皮細胞操作 | T25m2 | CS-963744 |
人前列腺上皮細胞【Human Prostate : Normal Prostate Epithelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養NINHYDRIN蛋白質濃度定量試劑盒100 葡聚糖T 1g
Nitsch基礎培養基500毫升溶液/片劑 軟骨素硫酸鈉鹽 500mg
Nitsch*培養基500毫升溶液/片劑 D纖維二糖 HPLC≥98% 100mg
N-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 千層紙素AβD葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 5mg
NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISA試劑盒裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 土霉素 HPLC≥98% 100mg
NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規格:96T/48T 吩噻嗪 GC≥98% 100mg
Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISA試劑盒裸鼠環加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 藏紅花酸二醛 HPLC≥98% 10mg
NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 奧司他韋 HPLC≥98% 20mg
Oh固著液50毫升 阿夫兒茶精 HPLC≥98% 5mg
Oligo(dT)18(500納克/微升)100微升 阿福豆苷 HPLC≥98% 5mg
Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規格:96T/48T 野馬追內酯K HPLC≥98% 20mg
載玻片細胞P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 梓甙 HPLC≥95% 20mg
Mousefractalkine/CX3CL1ELISAKit小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 異紅花八角醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠晚期糖基化終末產物(AGE)ELISA試劑盒 ,英文名: AGE ELISA Kit 乙酰桉樹素 HPLC≥95% 20mg
兔子白介素9(IL-9)ELISA檢測試劑盒RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit 96T/48T 知母皂苷B HPLC≥98% 20mg
牛狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Bovine i-iodothyronine,T3 ELISA Kit 丹參素 HPLC≥98% 20mg
英文名稱Humahyroid-PeroxidaseELISAKit人甲狀腺過氧化物酶(TPO)規格:96T/48T 原B HPLC≥98% 20mg
動物多核白細胞分離試劑盒10 原C HPLC≥98% 20mg
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA試劑盒大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規格:96T/48T 蓮心堿高氯酸鹽 HPLC≥98% 20mg
小鼠外周鞘0脂蛋白22(PMP22)ELISA試劑盒 ,英文名: PMP22 ELISA Kit 脫氫芳樟醇 HPLC≥98% 20mg
人前列腺上皮細胞操作Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISA試劑盒大鼠細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻奈普汀鈉鹽 Tianeptine salt 質量規格:>98%,BR
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISAKit大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻螨酮標準溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 質量規格:10μg/ml,u=6%
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISA試劑盒大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻螨酮標準溶液(100μg/ml,u=3%) Hexythiazox solution 質量規格:100μg/ml,u=3%
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻螨酮(標準品) Hexythiazox 質量規格:分析標準品,99.5%
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻呋酰胺(分析標準品,96%) Thifluzamide 質量規格:分析標準品,96%
RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規格:96T/48T 噻蟲啉(標準品) Thiacloprid 質量規格:分析標準品
RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞曲司特/西拉達司/塞拉司特 Seratrodast 質量規格:含量≥98.0%
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞來昔布羧酸 Celecoxib Carboxylic Acid 質量規格:美國進口
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞來昔布,塞內昔布,賽利克西 Celecoxib 質量規格:含量> 99%,BR,可用于細胞培養
Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞來昔布,塞內昔布(標準品) Celecoxib 質量規格:HPLC>98%,標準品
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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