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人腎成纖維細胞【Human Renal : Normal Renal Fibroblasts】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 人腎成纖維細胞直銷 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963745 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA檢測試劑盒ChickenAcetoaceticacid,ACAC 96T/48T L(-)-二苯甲酰一水(>98%,BR) L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate 質量規格:>98%,BR
雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3 96T/48T 乳糖酸(>98%,BC) Lactobionic acid 質量規格:>98%,BC
雞主要組織相容性復合體(MHC/B)ELISA檢測試劑盒Chickenmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/B 96T/48T L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 質量規格:BC
雞轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1 96T/48T L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 質量規格:BC
基因靶標技術試劑盒5 乙酸鑭五水(>99%,BR) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate 質量規格:>99%,BR
基因化程度定量分析試劑盒20 L-刀豆氨酸硫酸鹽(>98%,BR) L-Canavanine sulfate salt 質量規格:>98%,BR
基因化程度定量分析試劑盒5 左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR) L-Carnitine 質量規格:>98%,BR
基因化分析20樣本 左旋肉堿鹽(>99%,BR) L-Carnitine L-tartrate 質量規格:>99%,BR
基因化檢測DNA修飾試劑盒20 化鉛(>98%,BR) Lead (II) iodide 質量規格:>98%,BR
基因化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒60 硬脂酸鉛 Lead (II) stearate 質量規格:BR
兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA檢測試劑盒Rabbitsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T Thunberginol C HPLC≥95% 20mg
牛軟骨寡聚基質蛋白(COMP)試劑盒 Bovine Cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit (Z),開環甘遂(),,三烯,二酸 HPLC≥95% 20mg
英文名稱humaSIELISAKIT人甲狀腺刺激激素(TSI)規格:96T/48T 木蝴蝶苷A HPLC≥98% 20mg
動物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量檢測試劑盒20 羥基異亮氨酸 HPLC≥98% 20mg
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲氧基喜樹堿 HPLC≥98% 20mg
小鼠外周蛋白(PRPH)ELISA試劑盒 ,英文名: PRPH ELISA Kit 異烏藥內酯 HPLC≥98% 20mg
兔子D二聚體(D2D)ELISA檢測試劑盒RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 96T/48T 靈芝酸DM HPLC≥95% 20mg
牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)試劑盒 Bovine milk fat globule-EGF factor 8 protein,MFGE8 ELISA Kit 紫樹甙 HPLC≥95% 20mg
英文名稱humanPTHELISAKIT人甲狀旁腺激素(PTH)規格:96T/48T 吲哚丙烯酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
動物肺組織細胞分離培養試劑盒10 石杉堿甲 HPLC≥99% 20mg
人腎成纖維細胞直銷Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞來西布 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞克硝唑(標準品) Secnidazole 質量規格:HPLC>98%,標準品
Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞克硝唑 Secnidazole 質量規格:>99%,BR
Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞卡替尼 Saracatinib(AZD0530) 質量規格:≥98.50%;Src抑制劑
Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞香素/祖師麻甲素(標準品) Daphnetin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞香素 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞替加濱堿 Retigabine Base 質量規格:含量>99.0%
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞替加濱 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞替加濱 Retigabine 質量規格:HPLC>95%,
RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 瑞他帕林;瑞他莫林 Retapamulin 質量規格:>99%,BR
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
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