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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
成人皮膚成纖維細胞價格 | T25m2 | CS-963774 |
成人皮膚成纖維細胞【Human Skin: Normal Dermal Fibroblasts】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養小鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒 ,英文名: AMH ELISA Kit 硫酸普拉鈉(標準品) Dehydroepiandrosterone-3-sulfate 質量規格:含量測定
小鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA檢測試劑盒MouseannexinⅤ,ANX-Ⅴ 96T/48T 撲米酮(標準品) Primidone 質量規格:檢查
小鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 ,英文名: ANX-Ⅴ ELISA Kit 葡萄糖酸鋅(標準品) Zinc gluconate 質量規格:檢查
小鼠膜聯蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒 ,英文名: ANXA1 ELISA Kit 曲安西龍(標準品) Triamcinolone 質量規格:含量測定
小鼠膜聯蛋白A2(ANXA2)ELISA試劑盒 ,英文名: ANXA2 ELISA Kit 舒林酸(標準品) Sulindac 質量規格:檢查
小鼠膜聯蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒 ,英文名: ANXA5 ELISA Kit HSP990 NVP-HSP990 質量規格:>98%,Hsp90抑制劑
小鼠膜鐵轉運蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ,英文名: FPN ELISA Kit 鹽酸妥拉唑林(標準品) Tolazoline HCl 質量規格:含量測定
小鼠末端補體復合體C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒 ,英文名: C5b-9 ELISA Kit 鹽酸硫利達嗪(標準品) Thioridazine 質量規格:鑒別
小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 ,英文名: TCC C5b-9 ELISA Kit 鹽酸卡替洛爾(標準品) 2(1H)-QUINOLINONE 質量規格:鑒別
小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測試劑盒MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9 96T/48T 二甲磺酸阿米三嗪(標準品) Almitrine Bismesylate 質量規格:含量測定
Ratferritin,FEELISAKit大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規格:96T/48T 縮宮素,醋酸催產素 Oxytocin Acetate 質量規格:>97%,BR
751型分光光度儀1毫升1厘米光徑石英比色皿1個 紫杉醇 Paclitaxel 質量規格:>99%,BR,用于細胞培養,藥劑造模
Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA試劑盒小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T 紫杉醇(標準品) Paclitaxel 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠特異生長因子/相關因子(TSGF)ELISA試劑盒 ,英文名: TSGF ELISA Kit 鹽酸帕洛諾司瓊 Palonosetron HCl 質量規格:>98.5%,BR,可用于細胞培養
小鼠化酶(Methylase)ELISA檢測試劑盒MouseMethylaseELISAKit 96T/48T 硫酸巴龍霉素 Paromomycin Sulfate 質量規格:≥675 U/mg,USP28
人抗Scl-70抗體試劑盒 Human ai-Scl-70 aibody ELISA Kit 硫酸巴龍霉素(標準品) Paromomycin Sulfate 質量規格:含量測定
Rat17-ketosteroids,17-KSELISAKit大鼠17-同類(17-KS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲磺酸帕珠沙星 Pazufloxacin Mesilate 質量規格:≥98%,BR
載玻片細胞MYC蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 甲磺酸帕珠沙星(標準品) Pazufloxacin Mesilate 質量規格:HPLC>98%,標準品
Lensculinarisagglinin,LCAELISA試劑盒扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲磺酸培氟沙星 Pefloxacin mesylate dihydrate 質量規格:≥99.0% ,水合物
小鼠特異生長因子/相關因子(TGSF)ELISA試劑盒 ,英文名: TGSF ELISA Kit 甲磺酸培氟沙星(標準品) Pefloxacin mesylate dihydrate 質量規格:HPLC>98%,標準品
成人皮膚成纖維細胞價格Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲酸 HPLC≥98% 20mg
Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲司氯銨 Trospium chloride 質量規格:>99%,EP6,BR
Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲匹地爾(標準品) Trapidil 質量規格:供鑒別用
RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲匹布通(標準品) Trepibutone 質量規格:UV法含量測定
RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲尼司特(標準品) Tranilast 質量規格:≥98%,標準品
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAKit大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲尼司特 Tranilast 質量規格:>98.0%
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲美替尼 Trametinib (GSK1120212) 質量規格:>99%,MEK抑制劑
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲美布汀堿 Trimebutine base 質量規格:>98%,BR
Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲洛司坦/ 亞硝酸鹽環氧雄烷 Trilostane 質量規格:>99.0%,BR
RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISAKit大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲洛司坦(標準品) Trilostane 質量規格:HPLC>98%,標準品
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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