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收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
人脂肪細胞【Human Fat: Normal Adipose Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 人脂肪細胞操作 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963776 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
Rabbitadramycin,ADRELISA試劑盒兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規格:96T/48T 球松素 HPLC≥98% 5mg
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒兔子促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒規格:96T/48T 球松素查爾酮 HPLC≥98% 5mg
Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISA試劑盒兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去甲布拉易林 HPLC≥98% 5mg
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去甲絡石甙元 HPLC≥98% 5mg
Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去甲氧基去乙酰氧基土槿甲酸 B HPLC≥98% 5mg
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去甲氧基矢車菊黃酮素 HPLC≥98% 5mg
RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA試劑盒兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去羥加利果酸 HPLC≥98% 5mg
Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去氫克班寧 HPLC≥98% 5mg
RabbitAmylinELISA試劑盒兔胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去氫苦木堿 HPLC≥98% 5mg
Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規格:96T/48T 去氫魚藤素 HPLC≥98% 5mg
Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA試劑盒大鼠交聯物(PY)ELISA試劑盒規格:96T/48T 醋酸普蘭林肽 Pramlintide Acetate 質量規格:度≥98.0%
小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 ,英文名: GP-MM ELISA Kit 普伐他丁鈉(標準品) Pravastatin 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T 普伐他丁鈉 Pravastatin 質量規格:>98%
人骨退化特異標志物(CTX-2)試劑盒 Human CTX-2 ELISA Kit 潑尼松龍 Prednisolone 質量規格:>98.5%,USP/BP
RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 潑尼松龍(標準品) Prednisolone 質量規格:HPLC>98%,標準品
751型分光光度儀1毫升1厘米光徑塑料比色皿1個 匹莫范色林;哌馬色林 Pimavanserin;ACP-103 質量規格:>98%,5-HT2A高效選擇性激動劑
MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISA試劑盒小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規格:96T/48T 富馬酸喹硫平 Quetiapine Fumarate 質量規格:>99%
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 ,英文名: GP-II ELISA Kit 富馬酸喹硫平(標準品) Quetiapine Fumarate 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T 雷特格韋鉀 Raltegravir K 質量規格:含量>98.5%,BR
人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit 雷特格韋 Raltegravir 質量規格:>98.5%,BR
人脂肪細胞操作RatSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲格列汀 Trelagliptin free base 質量規格:>98%,BR
RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲安西龍(標準品) Triamcinolone 質量規格:含量測定
RatSomatostatin,SSELISAKit大鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲安奈德(標準品) Triamcinolone Acetonide 質量規格:>98%,標準品
RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲安奈德 Triamcinolone Acetonide 質量規格:>98%,BR
RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒規格:96T/48T 趨嗜曙紅細胞肽 Eosinophilotactic Peptide 質量規格:>95%,BR
RatSubstanceP,SPELISAKit大鼠P物質(SP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 屈螺酮酸鉀鹽 Drospirenone Acid Potassium Salt 質量規格:美國進口
RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒規格:96T/48T 屈螺酮(標準品) Drospirenone 質量規格:HPLC>98%,標準品
RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒規格:96T/48T 屈螺酮 Drospirenone 質量規格:>98%,USP grade
Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒規格:96T/48T 屈(標準品) Chrysene 質量規格:分析標準品
Rattelomerase,TEELISAKit大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒規格:96T/48T 球松素查爾酮 HPLC≥98% 5mg
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