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收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
小鼠滑膜細胞【Mouse Bone Joint: Normal Synovial Cell】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠滑膜細胞價格 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963782 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
GST(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 青蒿乙素 HPLC≥98% 20mg
GST釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒2/5 青霉素酶 HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白PROTEASE酶切試劑盒10 青藤堿 HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白THROMBIN酶切試劑盒10(500微克/) 青陽參苷元 HPLC≥98% 5mg
GST融合蛋白THROMBIN酶切*試劑盒10(500微克/) 青陽參苷元A HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白化試劑盒5 青陽參苷元B HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白谷胱甘肽樹脂再生試劑盒20 HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白擴增試劑盒10 秋水仙堿 HPLC≥98% 20mg
GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶標記試劑盒20 曲克蘆丁 HPLC≥98% 100mg
GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)激酶標記試劑盒20 去甲檳榔堿 HPLC≥98% 20mg
Mouseglycogensyhasekinase,GSKELISA試劑盒小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規格:96T/48T 他克莫司(標準品) Tacrolimus /FK506 monohydrate 質量規格:≥98%,標準品
小鼠糖皮質類受體(GR)ELISA試劑盒 ,英文名: GR ELISA Kit 枸櫞酸他莫昔芬 Tamoxifen 質量規格:>99.0%,BR,可用于細胞培養
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin6,IL-6ELISAKIT 96T/48T 枸櫞酸他莫昔芬(標準品) Tamoxifen 質量規格:HPLC>99%,標準品
人骨膠原交聯(Cr)試劑盒 Human Crosslaps,Cr ELISA Kit 坦度替尼;MLN518 Tandutinib 質量規格:>98.0%;FLT3拮抗劑
RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 坦度替尼(標準品) Tandutinib 質量規格:HPLC>98%,標準品
ACD血液抗凝液100毫升 拉寧 Teicoplanin 質量規格:potency>900ug/mg,BR
Mousegonadoopin-releasinghormone,GHELISA試劑盒小鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規格:96T/48T 替尼泊甙,替尼泊苷 Teniposide 質量規格:>98%,BR
小鼠糖皮質類受體(GR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 替尼泊甙,替尼泊苷(標準品) Teniposide 質量規格:HPLC>98%,標準品
The formation of red blood cells of rat prolactin receptor (EPOR) ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 富馬酸替諾福韋酯;泰諾福韋酯 Tenofovir disoproxil fumarate 質量規格:>98%,富馬酸鹽,BR
Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit 人末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 替諾福韋富馬酸(標準品) Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate 質量規格:≥98%,標準品
小鼠滑膜細胞價格RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿乙素 HPLC≥98% 20mg
RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿酸(標準品) Artemisic acid 質量規格:HPLC≥98%,標準品
RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿酸 HPLC≥98% 20mg
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿琥酯(標準品) Artesunate 質量規格:HPLC≥99%,含量測定
Ratverylateappearingaigen,VLAELISAKit大鼠遲現抗原(VLA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿琥酯 HPLC≥98% 100mg
RatVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit大鼠內臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 青蒿琥酯 Artesunate 質量規格:HPLC≥98%,BR
RatvisfatinELISAKit大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 嗪草酮(>95%,植物激素級) Metribuzin 質量規格:>95%,植物激素級
RatVitaminA,VAELISAKit大鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 嗪氨靈(標準品) Triforin 質量規格:分析標準品
RatVitaminB12,VB12ELISAKit大鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規格:96T/48T 秦皮乙素;6,7-二羥基;七葉亭 6,7-Dihydroxycoumarin 質量規格:HPLC≥98%
RatVitaminB6,VB6ELISAKit大鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規格:96T/48T 秦皮乙素(標準品) 6,7-Dihydroxycoumarin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
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