當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2小鼠大隱靜脈內皮細胞說明
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
小鼠大隱靜脈內皮細胞【Mouse Vascular : Normal Saphenous Vein Endothelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠大隱靜脈內皮細胞說明 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963807 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
人臂板蛋白3A(Sema 3A)試劑盒 Human Sema 3A ELISA Kit 偶氮磺III(>90.0%(HPLC)) Sulfonazo III 質量規格:>90.0%(HPLC)
人臂板蛋白3F(S3F)試劑盒 Human S3F ELISA Kit 2-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC)) 3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate 質量規格:>95.0%(HPLC)
人臂板蛋白4C(Sema 4C)試劑盒 Human Sema 4C ELISA Kit 2,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T)) 2,2'-Dihydroxyazobenzene 質量規格:>98.0%(T)
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA檢測試劑盒Humanflagellin 96T/48T 芪偶氮 Stilbazo 質量規格:鋁和其他金屬等用分光光度試劑
人鞭毛蛋白(flagellin)試劑盒 Human flagellin ELISA Kit 熒光鎵試劑(>98.0%(T)) Lumogallion 質量規格:>98.0%(T)
人變(MN)試劑盒 Human metanephrine,MN ELISA Kit 浴酮靈二磺酸二鈉鹽 Di Bathocuproinedisulfonate 質量規格:用于血液中銅的測定
人表達于SiSo細胞系的受體結合型腫瘤抗原(R1)試劑盒 Human R1 ELISA kit 水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物 Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Di Salt Hydrate 質量規格:用于亞鐵離子的測定
人表試劑盒 Human Epitestosterone ELISA Kit 浴銅靈 (升華提)(>99.0%(HPLC)(T)) Bathocuproine (purified by sublimation) 質量規格:>99.0%(HPLC)(T)
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒HumanSurfactaProteinA,SP-A 96T/48T 紅菲繞啉(升華提)(>99.0%(HPLC)(T)) Bathophenanthroline (purified by sublimation) 質量規格:>99.0%(HPLC)(T)
人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA檢測試劑盒HumanSurfactaProteinD,SP-D 96T/48T 浴銅靈(>98.0%(T)) Bathocuproine 質量規格:>98.0%(T)
Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit大鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規格:96T/48T 泰諾福韋;替諾福韋(標準品) Tenofovir 質量規格:HPLC≥99%,標準品
AP反應終止緩沖液100毫升 阿立哌唑 Aripiprazole 質量規格:>99%,BR
MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T 阿立哌唑(標準品) Aripiprazole 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO ELISA Kit 子囊霉素 Ascomycin,FK520 質量規格:>97%,BR
小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA檢測試劑盒MouseOncostatin-M,OSMELISAKIT 96T/48T 子囊霉素(標準品) Ascomycin,FK520 質量規格:HPLC>99%,標準品
人谷氨酸脫羧酶(GAD)試劑盒 Human glamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit 阿扎那韋 Atazanavir 質量規格:≥99.0%
Ratglucocoicoid,GCELISAKit大鼠內源性糖皮質激素(GC)ELISA試劑盒規格:96T/48T 阿扎那韋(標準品) Atazanavir 質量規格:HPLC>98%,標準品
AP生物素穩定/稀釋溶液10毫升 鹽酸托莫西汀 Atomoxetine HCl 質量規格:>99%,BR
MousehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISA試劑盒小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T 鹽酸托莫西汀(標準品) Atomoxetine HCl 質量規格:HPLC>99%,標準品
小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 阿托伐醌,阿托喹酮 Atovaquone 質量規格:>98.5%,USP32,BR,可用于細胞培養
小鼠大隱靜脈內皮細胞說明冰凍切片組織蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒-LEPTIN10/20 普羅布考 Probucol 質量規格:>99%
冰凍切片組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性原位熒光染色檢測試劑盒20 普侖司特半水合物 Pranlukast hemihydrate 質量規格:美國進口
冰凍切片組織蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位熒光染色檢測試劑盒20 普侖司特 Pranlukast 質量規格:≥98%,BR
冰凍切片組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性原位熒光染色檢測試劑盒20 普魯士蘭(>98%,BS) Prussian blue 質量規格:>98%,BS
冰凍切片組織鈣ATP酶PMCA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普魯蘭糖;普魯蘭多糖 Pullulan 質量規格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
冰凍切片組織線粒體復合物I蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普魯卡因青霉素G Penicillin G procaine 質量規格:美國進口
冰凍切片組織線粒體復合物V蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普盧利沙星;普利沙星(標準品) Prulifloxacin 質量規格:HPLC>98%,標準品
冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒50 普盧利沙星;普利沙星 Prulifloxacin 質量規格:>99%,BR
冰凍切片組織組蛋白H3-K4化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普樂沙福,CXCR抑制劑 Plerixafor,AMD3100 質量規格:>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑
冰凍切片組織組蛋白H3-K9化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普拉洛芬(標準品) Pranoprofen 質量規格:HPLC>97%,標準品
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