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小鼠膀胱上皮細胞【Mouse Bladder:Normal Bladder Epithelial Cells】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠膀胱上皮細胞操作 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963812 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
組蛋白H3-T110酸化檢測試劑盒10/20等 2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶 2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol 質量規格:美國進口
組蛋白H3-T30酸化檢測試劑盒10/20等 外消旋拉呋替丁 rac Lafutidine 質量規格:美國進口
組蛋白H3-T450酸化檢測試劑盒10/20等 羅沙替丁 Roxatidine 質量規格:美國進口
組蛋白H3乙酰化檢測試劑盒10/20等 普魯卡因青霉素G Penicillin G procaine 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K12乙酰化檢測試劑盒10/20等 芐星青霉素G Penicillin G benzathine salt 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K16乙酰化檢測試劑盒10/20等 尼泊金異丁酯-d9 Isobutyl-d9 Paraben 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K20(mono/di/i)化檢測試劑盒10/20等 尼泊金異丁酯 Isobutyl Paraben 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K31(mono)化檢測試劑盒10/20等 尼泊金異丙酯 Isopropyl Paraben 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K5乙酰化檢測試劑盒10/20等 戊基尼泊金 Pentyl Paraben 質量規格:美國進口
組蛋白H4-K8乙酰化檢測試劑盒10/20等 尼泊金丁酯-d9 Butyl-d9 Paraben 質量規格:美國進口
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 米帕明/丙咪嗪 Clomipramine HCL 質量規格:>99%,BR
小鼠酸脫氫酶0酸酶(PDP)ELISA試劑盒 ,英文名: PDP ELISA Kit 米帕明/丙咪嗪(標準品) Clomipramine HCL 質量規格:HPLC>98%,標準品
人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA檢測試劑盒Humancytovillin/ezrinELISAKit 96T/48T 硫酸氫氯吡格雷 I型 Clopidogrel Bisulfate 質量規格:>98%,I型
大鼠可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)試劑盒 Rat soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 硫酸氫氯吡格雷 II型(標準品) Clopidogrel Bisulfate 質量規格:>98%,標準品
英文名稱RatBSAELISAKit大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測規格:96T/48T 硫酸氫氯吡格雷 II型 Clopidogrel Bisulfate 質量規格:含量97.0%-101.5%,II型
金黃色葡萄球菌腸E(Staphylococcusaureus:eerotoxinE)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20 萘丁美酮/萘普酮 Nabumetone 質量規格:>99%
ELISAKitGROβ/CXCL2/MGSA人生長調節致癌基因β規格:48T/96T 萘丁美酮/萘普酮(標準品) Nabumetone 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA試劑盒 ,英文名: PDK4 ELISA Kit 地瑞拉韋 Darunavir 質量規格:>98%
人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA檢測試劑盒Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 96T/48T 沃氏物 Methoxydienone 質量規格:含量≥85%
大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒 Rat soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit DL-α-羥基戊二酸二鈉 DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt 質量規格:98%,GC,進分sigma 94577
小鼠膀胱上皮細胞操作超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解樣品制備試劑盒50 潑尼松龍鈉 Prednisolone phosphate 質量規格:>97%,USP
超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒50 潑尼松龍(標準品) Prednisolone 質量規格:HPLC>98%,標準品
超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒50 潑尼松龍 Prednisolone 質量規格:>98.5%,USP/BP
超氧化物歧化酶(SOD)細菌裂解樣品制備試劑盒50 潑尼松(標準品) Prednisone 質量規格:HPLC>98%,標準品
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒50 潑尼松 Prednisone 質量規格:>98%,USP30,BR
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒50 蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml,BC) Malate dehydrogenase 質量規格:>12,000U/ml,BC
超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒50 蘋果酸舒尼替尼(標準品) Sunitinib Malate 質量規格:HPLC>98%,標準品
超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒50 蘋果酸舒尼替尼 Sunitinib Malate 質量規格:>99.0%,BR
超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液1毫升/500毫摩爾 蘋果酸 HPLC≥98% 20mg
沉淀法去內試劑盒20 平貝堿甲 HPLC≥98% 20mg
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
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