當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2小鼠腎上皮細胞直銷
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
產品名稱 | 小鼠腎上皮細胞直銷 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963817 |
小鼠腎上皮細胞【Mouse Kidney: Normal Renal Artery Endothelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit 氟鋁酸鈉(>98%,BR) fluoroaluminate 質量規格:>98%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 馬尿酸鈉(>98%,BR) hippurate 質量規格:>98%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-B 96T/48T 鈉(>95%,BR) laurate 質量規格:>95%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-B ELISA Kit 偏鋁酸鈉(分子生物學級) metaaluminate 質量規格:分子生物學級
小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-C 96T/48T 偏釩酸鈉二水(>98%,BC) metavanadate dehydrate 質量規格:>98%,BC
小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-C ELISA Kit 正辛酸鈉(>98%,BR) n-caprylate 質量規格:>98%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 草氨酸鈉(>98%,BC) oxamate 質量規格:>98%,BC
小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF-D ELISA Kit 苯二鈉二水(>98%,BR) phenyl phosphate, dehydrate 質量規格:>98%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA檢測試劑盒MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1 96T/48T 2-萘磺酸鈉(>98%,BR) -2-naphthalenesolfonate 質量規格:>98%,BR
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 司班20 Span* 20 質量規格:BR
大鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T 亞胺培南(標準品) Imipenem monohydrate 質量規格:HPLC>98%,標準品
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)試劑盒 Human α-SMA ELISA Kit 吲達帕胺 Indapamide 質量規格:>99%,EP6.0,BR
英文名稱MouseICAM-2/sCD102ELISAKit小鼠細胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)規格:96T/48T 吲達帕胺(標準品) Indapamide 質量規格:HPLC>98%,標準品
SiRNA大量SperfusinX脂質體細胞轉染試劑盒10 帕醇(標準品) Iopamidol 質量規格:HPLC>98%,USP
rabbitImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒兔子球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 帕醇 Iopamidol 質量規格:>98%,USP
小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鹽酸洛哌丁胺 Loperamide HCl 質量規格:>98%,BR
Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化1(HYD)ELISA試劑盒 鹽酸洛哌丁胺(標準品) Loperamide HCl 質量規格:HPLC>99%,標準品
HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 酮咯酸氨丁三醇 Ketorolac Tromethamine 質量規格:>98.5%,USP,BR
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T 酮咯酸氨丁三醇(標準品) Ketorolac Tromethamine 質量規格:HPLC>98%,標準品
植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20 蘭索拉唑 Lansoprazole 質量規格:干品含量>98%,USP32
小鼠腎上皮細胞直銷化線粒體凍存液(生物能量學保護)50毫升 硼標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Boron solution 質量規格:1000μg/ml,溶劑:水
化線粒體呼吸控制率(RCR)定量檢測試劑盒20 硼標準溶液(100µg/mL,基體:水) Boron solution 質量規格:100µg/mL,基體:水
化線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20 噴昔洛韋-d4 Penciclovir-d4 質量規格:美國進口
化線粒體膜流動性(membranefluidity)熒光檢測試劑盒20 噴昔洛韋(標準品) Penciclovir 質量規格:含量測定
化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測試劑盒20 噴昔洛韋 Penciclovir 質量規格:>98%,BR,細胞培養級
化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒20 噴托維林 Carbetapentane 質量規格:美國進口
化線粒體內膜功能/膜電位測定試劑盒100 培美曲塞酸(標準品) Pemetrexed 質量規格:HPLC≥98%,標準品
化線粒體溶解試劑盒20 培美曲塞酸 Pemetrexed 質量規格:>98%
化線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/200 培美曲塞二鈉-d5 Pemetrexed-d5 Di Salt 質量規格:美國進口
化線粒體細胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20 培美曲塞二鈉(標準品) Pemetrexed Di 質量規格:HPLC>98%,標準品
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