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小鼠肺泡巨噬細胞【Mouse Alveolar:Alveolar Macrophages】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠肺泡巨噬細胞操作 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963836 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠白細胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit 酯蟾毒配基;蟾力蘇(標準品) Resibufogenin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠白細胞介素13(IL-13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit 蒲公英甾醇(標準品) Taraxasterol 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠白細胞介素16(IL-16)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit TAK875 TAK-875 質量規格:>98%,GPR40激動劑
小鼠白細胞介素17(IL-17)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit 尼群地平 Nitrendipine 質量規格:>98%,BR
小鼠白細胞介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1α ELISA Kit 尼群地平(標準品) Nitrendipine 質量規格:含量測定
小鼠白細胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit 華蟾毒它靈;華蟾素(標準品) Cinobufotalin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠白細胞介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit 維甲酰酚胺 Fenretinide(4-HPR) 質量規格:>98%,BR
小鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1β ELISA Kit 2-氨基嘌呤,異腺嘌呤;異腺素;2-AP 2-Aminopurine 質量規格:>98%,BR
小鼠白細胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit 遠華蟾蜍精(標準品) Telocinobufagin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit 日蟾蜍他靈;和蟾毒他靈(標準品) Gamabufotalin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 ,英文名: ECP ELISA Kit 馬賽替尼 Masitinib 質量規格:>98%
小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA檢測試劑盒MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3ELISAkit 96T/48T 美西林/氮脒青霉素 Mecillinam 質量規格:>95%,BR
人高糖基化人絨毛膜促性腺激素(hCG)試劑盒 Human hCG ELISA Kit 甲羥孕酮/安宮黃體素 Medroxyprogesterone 質量規格:>98%,BR
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲羥孕酮(標準品) Medroxyprogesterone 質量規格:>98%,標準品
BAX蛋白共沉淀分析試劑盒5 甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-咪唑 Methimazole 質量規格:>98%,USP 32
MouseInsulieceptorβ,ISR-βELISA試劑盒小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲巰咪唑(標準品) Methimazole 質量規格:>98%,標準品
小鼠嗜酸性粒細胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒 ,英文名: Eotaxin ELISA Kit 美索巴莫 Methocarbamol 質量規格:>98.5%,USP 32
雞白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒ChickenIerleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T 美索巴莫(標準品) Methocarbamol 質量規格:HPLC>98%,標準品
人60S核糖體蛋白L17(RPL17)試劑盒 Human RPL17 ELISA kit 潑尼松龍 Methylprednisolone 質量規格:>97%,BR,可用于細胞培養
英文名稱MouseIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT小鼠白介素-11(IL-11)規格:96T/48T 潑尼松龍(標準品) Methylprednisolone 質量規格:HPLC>97.5%,標準品
小鼠肺泡巨噬細胞操作大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T 尼扎替?。藴势罚?/span> Nizatidine 質量規格:HPLC法含量測定
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit 96T/48T 尼扎替丁 Nizatidine 質量規格:>98.5%,USP31
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 96T/48T 尼亞希木脂素苷 HPLC≥98% 5mg
大鼠高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit 96T/48T 尼替西農 HPLC≥98% 20mg
大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T 尼日利亞菌素鈉鹽 Nigericin 質量規格:>98%,進分
大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,TELISAKit 96T/48T 尼群地平(標準品) Nitrendipine 質量規格:含量測定
大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA檢測試劑盒RatLebtospiraIgGELISAKit 96T/48T 尼群地平 Nitrendipine 質量規格:>98%,BR
大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 96T/48T 尼莫地平-d7 Nimodipine-d7 質量規格:美國進口
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T 尼莫地平(標準品) Nimodipine 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA檢測試劑盒RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T 尼莫地平 HPLC≥98% 20mg
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
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