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大鼠胃粘膜上皮細胞【Rat Gastric: Normal Gastric Mucosal Epithelial Cells】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠胃粘膜上皮細胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963877 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RatIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 仙茅木酚素 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin8,IL-8大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬尾柴酸 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin8,IL-8ELISA試劑盒大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin9,IL-9大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 愈創(chuàng)木素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 黃獨素D HPLC≥95% 20mg
Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABP大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 重樓皂苷VII HPLC≥95% 20mg
Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 竹葉椒堿 HPLC≥95% 20mg
RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 槐定堿 HPLC≥98% 20mg
Ratiglyceride,TG大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 齒孔醇 HPLC≥95% 20mg
Rati-iodothyronine,T3大鼠狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 C HPLC≥95% 20mg
人鈣結合蛋白S100A13 試劑盒 Human S100A13 ELISA Kit 鹽酸藥根堿(標準品) Jatrorrhizine 質量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T D-半乳糖胺鹽酸鹽 D(+)-Galactosamine 質量規(guī)格:BR,98%
Caspase-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標準品) Dioscin 質量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
MouseL-phenylalanine,LPAELISA試劑盒小鼠苯氨酸(LPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 薯蕷皂甙 Dioscin 質量規(guī)格:BR,含量≥95.0%
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 ,英文名: i-PTH ELISA Kit 薯蕷皂素(標準品) Diosgenin 質量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 96T/48T 薯蕷皂素 Diosgenin 質量規(guī)格:>95%,BR
人鈣激活中性蛋白酶6(CAPN6)試劑盒 Human calpain 6,CAPN6 ELISA Kit 柚皮素(標準品) Naringenin 質量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柚皮素 Naringenin 質量規(guī)格:HPLC>97%
PASE-3蛋白共沉淀分析試劑盒5 藥根堿(標準品) Jatrorrhizine 質量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 槲皮素 Quercetin dihydrate 質量規(guī)格:HPLC>85%,二水BR
大鼠胃粘膜上皮細胞直銷大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)試劑盒 Rat relaxin 1,RLN1 ELISA kit 馬來酸氟伏沙明 Fluvoxamine maleate 質量規(guī)格:>98.5%,BP2007
大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA檢測試劑盒RatPyruvateKinase,M2-PKELISAKit 96T/48T 馬來酸氟吡汀(標準品) Flupirtine maleate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠酸性0酸酶(ACP)試劑盒 Rat Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit 馬來酸氟吡汀 Flupirtine maleate 質量規(guī)格:>98%
大鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)試劑盒 Rat glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit 馬來酸非尼拉敏 Pheniramine Maleate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠酸性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)試劑盒 Rat acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit 馬來酸二乙酯(>98%,BR) Diethyl maleate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測試劑盒Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T 馬來酸二甲酯(>98%,BR) Dimethyl maleate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 Rat myelin basic protein,MBP ELISA Kit 馬來酸二丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Dibutyl maleate 質量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)
大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA檢測試劑盒Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit 96T/48T 馬來酸氨氯地平(標準品) Amlodipine maleate 質量規(guī)格:HPLC法含量測定
大鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 Rat Myeloperoxidase,MPO ELISA kit 馬來酸氨氯地平 Amlodipine maleate 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒 Rat myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit 馬來酸阿扎他啶 Azatadine Maleate 質量規(guī)格:>98%,BR
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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