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大鼠血管內皮細胞【Rat Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠血管內皮細胞直銷 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963881 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PAMY人胰淀粉酶規格:48T/96T 馬兜鈴酮 HPLC≥98% 20mg
Pancreastatin人胰抑制素規格:48T/96T 馬來酸 HPLC≥98% 20mg
PAP人纖溶酶抗纖溶酶復合物規格:48T/96T 馬錢苷 HPLC≥98% 20mg
PBP/CXCL7人血小板堿性蛋白規格:48T/96T 馬錢苷酸 HPLC≥98% 20mg
PCDH1人原鈣黏素1規格:48T/96T 買麻藤醇 GC≥97% 20mg
PC人血漿抗凝蛋白C規格:48T/96T 麥冬苷元OαL吡喃鼠李糖基(→)βD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
PDGF-AB人血血小板衍生生長因子AB規格:48T/96T 麥冬黃烷酮A HPLC≥98% 10mg
PDGF-BB人血小板衍生生長因子BB規格:48T/96T 麥冬內酯A HPLC≥98% 20mg
PDGF人血小板衍生生長因子規格:48T/96T 麥冬皂苷A HPLC≥98% 10mg
Peosidine人戊糖素規格:48T/96T 麥冬皂苷B HPLC≥98% 5mg
小鼠趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 ,英文名: CXCL16 ELISA Kit 依澤替米貝;依折麥布(標準品) Ezetimibe 質量規格:HPLC>99%,標準品
豬轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T 鹽酸甲哌卡因 Mepivacaine HCl 質量規格:>99%,BR
大鼠壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(AIL-R1)試劑盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit 安普那韋 Amprenavir 質量規格:>97%
英文名稱HumanMGβ2ELISAKit人β2微球蛋白(MGβ2)規格:96T/48T 魯比替康; 9-硝基喜樹堿 Rubitecan 質量規格:>99%
動物組織V型ATP酶(VtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 泊洛沙姆407 Polyethylene-polypropylene glycol 質量規格:M.W12000,進口BASF分包
Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 長春質堿 Catharanthine hemitartrate 質量規格:>95%,BR
小鼠趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 ,英文名: CX3CR1 ELISA Kit 硫酸長春質堿 Catharanthine sulfate 質量規格:>98%,BR
豬組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T 硫酸長春質堿(標準品) Catharanthine sulfate 質量規格:>98%,標準品
大鼠壞死因子相關凋亡誘導配體(AIL)試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit 康普瑞汀 Combretastatin A4 質量規格:>99%,細胞培養級
英文名稱Humanβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體Ig(A,G,M)(β2-GP1)規格:96T/48T 土霉素 Oxytetracycline 質量規格:≥95%,BR
大鼠血管內皮細胞直銷大鼠特異生長因子(TSGF)試劑盒 Rat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit 氯噻嗪(標準品) Chlorothiazide 質量規格:供HPLC法系統適用性試驗用
大鼠天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)試劑盒 Rat Aspaate Aminoansferase,AST ELISA kit 氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T)) Chloranilic Acid 質量規格:>98.0%(HPLC)(T)
大鼠鐵蛋白(FE)ELISA檢測試劑盒Ratferritin,FEELISAKit 96T/48T 氯前列醇鈉(D型) D-Cloprostenol 質量規格:>98.5%
大鼠鐵蛋白(FE)試劑盒 Rat ferritin,FE ELISA Kit 氯前列醇鈉(DL型) DL-Cloprostenol 質量規格:>98.5%,USP34
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA檢測試劑盒RatHomocysteicacid,HcyELISAKit 96T/48T 氯普噻噸(標準品) Chlorprothixene 質量規格:檢查
大鼠同型半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit 氯普噻噸 Chlorprothixene 質量規格:>98%,BR
大鼠銅藍蛋白(CP)試劑盒 Rat ceruloplasmin(ferroxidase)(CP)ELISA kit 氯諾昔康-d4 Lornoxicam-d4 質量規格:美國進口
大鼠透明質酸(HA)ELISA檢測試劑盒RatHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T 氯諾昔康(標準品) Lornoxicam 質量規格:HPLC>99%,標準品
大鼠透明質酸(HA)試劑盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 氯諾昔康 Lornoxicam 質量規格:>99%
大鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA檢測試劑盒RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit 96T/48T 氯尼達明 Lonidamine 質量規格:>99%,BR
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
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